PA317

PA317 è una linea cellulare di fibroblasti murini che è stata ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un sistema di impacchettamento retrovirale anfotropico. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella terapia genica e nella ricerca di biologia molecolare come produttrice di retrovirus ricombinanti in grado di trasdurre un’ampia gamma di cellule di mammiferi. La linea PA317 deriva dai fibroblasti NIH/3T3 e conserva la morfologia dei fibroblasti pur dimostrando la capacità di produrre retrovirus ad alto titolo.

Le cellule PA317 sono progettate per fornire in trans i componenti retrovirali essenziali, inclusi i geni gag, pol ed env, pur essendo prive di sequenze virali in grado di replicarsi. Ciò garantisce la sicurezza in contesti sperimentali e terapeutici, impedendo la formazione di retrovirus in grado di replicarsi. La proteina di involucro anfotropica espressa dalle cellule PA317 consente ai retrovirus prodotti di infettare una vasta gamma di tipi cellulari in diverse specie, rendendo questa linea cellulare particolarmente preziosa per applicazioni che richiedono un trasferimento genico efficiente.

Questa linea cellulare è comunemente impiegata per produrre vettori retrovirali per il trasferimento genico negli studi preclinici, tra cui la ricerca sul cancro, l’ingegneria genetica e la medicina rigenerativa. Rappresenta inoltre la scelta preferita per la validazione dei costrutti di vettori retrovirali e l’ottimizzazione dei protocolli di produzione virale. La linea cellulare PA317 costituisce una piattaforma affidabile per il trasferimento genico mediato da retrovirus, favorendo i progressi nella terapia genica e nella ricerca sulla genomica funzionale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia