PA317
Cell line · Product number 305617
Customization / Recommendations
- PA317Cell line€550.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
PA317 เป็นสายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของหนูที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเพื่อแสดงออกอย่างคงที่ระบบบรรจุเรโทรไวรัสแบบแอมฟโทรปิก สายเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยด้านการบำบัดด้วยยีนและชีววิทยาโมเลกุล ในฐานะผู้ผลิตเรโทรไวรัสแบบรีคอมบิแนนท์ ซึ่งสามารถถ่ายทอดยีนไปยังเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมได้หลากหลายชนิด PA317 มีต้นกำเนิดจากเซลล์ไฟโบรบลาสต์ NIH/3T3 และยังคงรักษารูปแบบของเซลล์ไฟโบรบลาสต์ไว้ พร้อมทั้งแสดงความสามารถในการผลิตเรโทรไวรัสที่มีไทเตอร์สูง
เซลล์ PA317 ได้รับการออกแบบเพื่อส่งมอบองค์ประกอบเรโทรไวรัสที่จำเป็นแบบ trans รวมถึงยีน gag, pol และ env โดยไม่มีลำดับพันธุกรรมของไวรัสที่มีความสามารถในการจำลองตัวเอง ซึ่งช่วยรับประกันความปลอดภัยในบริบทการทดลองและการรักษา โดยการป้องกันการก่อตัวของเรโทรไวรัสที่มีความสามารถในการจำลองตัวเอง โปรตีนเอนเวลอปแบบแอมฟโทรปิกที่เซลล์ PA317 แสดงออก ทำให้เรโทรไวรัสที่ผลิตได้สามารถติดเชื้อเซลล์ประเภทต่าง ๆ ในหลายสปีชีส์ ซึ่งทำให้สายเซลล์นี้มีคุณค่าเป็นพิเศษสำหรับการประยุกต์ใช้ที่ต้องการการถ่ายโอนยีนอย่างมีประสิทธิภาพ
สายเซลล์นี้มักถูกใช้เพื่อผลิตเวกเตอร์เรโทรไวรัสสำหรับการส่งยีนในการศึกษาขั้นก่อนคลินิก รวมถึงการวิจัยโรคมะเร็ง วิศวกรรมพันธุกรรม และการแพทย์ฟื้นฟู นอกจากนี้ยังเป็นตัวเลือกที่นิยมสำหรับการตรวจสอบความถูกต้องของโครงสร้างเวกเตอร์เรโทรไวรัสและการปรับปรุงขั้นตอนการผลิตไวรัส PA317 เป็นแพลตฟอร์มที่เชื่อถือได้สำหรับการถ่ายโอนยีนโดยใช้เรโทรไวรัส ซึ่งช่วยสนับสนุนความก้าวหน้าในการรักษาด้วยยีนและการวิจัยด้านจีโนมิกส์เชิงหน้าที่
- Tissue
- เอ็มบริโอ
- Applications
- การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ
- Synonyms
- pA317
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This PA317 retroviral packaging line contains MoMLV gag/pol/env components enabling production of replication-defective retroviral particles. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- คล้ายไฟโบรบลาสต์
- Cell type
- ไฟโบรบลาสต์
04Identifiers
- Citation
- PA317 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305617)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3920
05Expression and susceptibility
- Viruses
- ไวรัสลูคีเมียของหนู Moloney (MoMLV)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- สถาบันสุขภาพแห่งชาติสวิตเซอร์แลนด์
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table
