PA317

PA317 ir peles fibroblastu šūnu līnija, kas ir ģenētiski modificēta, lai stabili ekspresētu amfotropo retrovirālo iepakošanas sistēmu. Šo šūnu līniju plaši izmanto gēnu terapijā un molekulārās bioloģijas pētījumos kā rekombinantā retrovīrusa ražotāju, kas spēj inficēt plašu zīdītāju šūnu spektru. PA317 ir atvasināta no NIH/3T3 fibroblastiem un saglabā fibroblastu morfoloģiju, vienlaikus spējot ražot retrovīrusus ar augstu titru.

PA317 šūnas ir izstrādātas tā, lai nodrošinātu būtiskas retrovīrusu sastāvdaļas trans veidā, tostarp gag, pol un env gēnus, vienlaikus neietverot replikācijas spējīgas vīrusa sekvences. Tas nodrošina drošību eksperimentālos un terapeitiskos apstākļos, novēršot replikācijas spējīgu retrovīrusu veidošanos. Amfotropā apvalka proteīna, ko ekspresē PA317 šūnas, ļauj ražotajiem retrovīrusiem inficēt dažādus šūnu tipus dažādām sugām, padarot šo šūnu līniju īpaši vērtīgu lietojumiem, kuros nepieciešama efektīva gēnu pārnese.

Šo šūnu līniju parasti izmanto, lai ražotu retrovirālos vektorus gēnu piegādei pirmsklīniskajos pētījumos, tostarp vēža pētniecībā, ģenētiskajā inženierijā un reģeneratīvajā medicīnā. Tā ir arī vēlamā izvēle retrovirālo vektoru konstrukciju validēšanai un vīrusu ražošanas protokolu optimizēšanai. PA317 nodrošina uzticamu platformu retrovīrusu mediētai gēnu pārnesei, veicinot progresu gēnu terapijas un funkcionālās genomikas pētījumos.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu