PA317

PA317 ist eine murine Fibroblasten-Zelllinie, die so modifiziert wurde, dass sie ein amphotropes retrovirales Verpackungssystem stabil exprimiert. Diese Zelllinie wird in der Gentherapie und in der molekularbiologischen Forschung häufig als Produzent rekombinanter Retroviren eingesetzt, die in der Lage sind, ein breites Spektrum von Säugetierzellen zu transduzieren. PA317 stammt von NIH/3T3-Fibroblasten ab und behält die Morphologie von Fibroblasten bei, während sie gleichzeitig die Fähigkeit besitzt, Retroviren mit hohem Titer zu produzieren.

PA317-Zellen sind so konzipiert, dass sie essentielle retrovirale Komponenten trans bereitstellen, darunter die Gag-, Pol- und Env-Gene, während ihnen replikationsfähige Virussequenzen fehlen. Dies gewährleistet die Sicherheit in experimentellen und therapeutischen Kontexten, indem die Bildung replikationsfähiger Retroviren verhindert wird. Das von PA317-Zellen exprimierte amphotrope Hüllprotein ermöglicht es den produzierten Retroviren, eine Vielzahl von Zelltypen verschiedener Spezies zu infizieren, was diese Zelllinie besonders wertvoll für Anwendungen macht, die einen effizienten Gentransfer erfordern.

Diese Zelllinie wird häufig zur Herstellung retroviraler Vektoren für den Gentransfer in präklinischen Studien eingesetzt, darunter in der Krebsforschung, der Gentechnik und der regenerativen Medizin. Sie ist zudem die bevorzugte Wahl für die Validierung retroviraler Vektorkonstrukte und die Optimierung viraler Produktionsprotokolle. PA317 bietet eine zuverlässige Plattform für den retrovirusvermittelten Gentransfer und unterstützt damit Fortschritte in der Gentherapie und der funktionellen Genomforschung.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung