PA317

A PA317 egy egér fibroblaszt sejtvonal, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze egy amfotróp retrovirális csomagolási rendszert. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a génterápiában és a molekuláris biológiai kutatásokban olyan rekombináns retrovírusok előállítására, amelyek képesek emlőssejtek széles körét transzduálni. A PA317 az NIH/3T3 fibroblasztokból származik, és miközben megőrzi a fibroblasztok morfológiáját, képes nagy titerű retrovírusok előállítására.

A PA317 sejteket úgy tervezték, hogy transz módon biztosítsák a retrovírusok alapvető komponenseit, beleértve a gag, pol és env géneket, miközben nem tartalmaznak replikációra képes vírusszekvenciákat. Ez biztosítja a biztonságot kísérleti és terápiás környezetben azáltal, hogy megakadályozza a replikációra képes retrovírusok kialakulását. A PA317 sejtek által expresszált amfotróp burkolófehérje lehetővé teszi, hogy a termelt retrovírusok különböző fajok széles körű sejttípusait megfertőzzék, ami ezt a sejtvonalat különösen értékessé teszi a hatékony génátvitelhez szükséges alkalmazások számára.

Ezt a sejtvonalat általában retrovirális vektorok előállítására használják génbejuttatás céljából preklinikai vizsgálatokban, ideértve a rákkutatást, a géntechnológiát és a regeneratív gyógyászatot. Emellett előnyös választás a retrovirális vektor-konstrukciók validálásához és a víruselőállítási protokollok optimalizálásához is. A PA317 megbízható platformot biztosít a retrovírusok által közvetített génátvitelhez, támogatva ezzel a génterápia és a funkcionális genomika kutatásának fejlődését.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban