PA317

PA317 es una línea celular de fibroblastos murinos que ha sido modificada genéticamente para expresar de forma estable un sistema de empaquetamiento retroviral anfotrópico. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación en terapia génica y biología molecular como productora de retrovirus recombinantes capaces de transducir una amplia gama de células de mamíferos. La PA317 se deriva de fibroblastos NIH/3T3 y conserva la morfología de los fibroblastos, al tiempo que muestra la capacidad de producir retrovirus de alto título.

Las células PA317 están diseñadas para proporcionar componentes retrovirales esenciales de forma trans, incluidos los genes gag, pol y env, al tiempo que carecen de secuencias virales capaces de replicarse. Esto garantiza la seguridad en contextos experimentales y terapéuticos, al impedir la formación de retrovirus capaces de replicarse. La proteína de envoltura amfotrópica expresada por las células PA317 permite que los retrovirus producidos infecten una amplia variedad de tipos celulares en diferentes especies, lo que hace que esta línea celular sea especialmente valiosa para aplicaciones que requieren una transferencia génica eficiente.

Esta línea celular se emplea habitualmente para producir vectores retrovirales destinados a la administración de genes en estudios preclínicos, entre los que se incluyen la investigación sobre el cáncer, la ingeniería genética y la medicina regenerativa. También es la opción preferida para validar construcciones de vectores retrovirales y optimizar los protocolos de producción viral. La PA317 proporciona una plataforma fiable para la transferencia génica mediada por retrovirus, lo que contribuye a los avances en la terapia génica y la investigación en genómica funcional.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía