PA317

A PA317 é uma linha celular de fibroblastos murinos que foi geneticamente modificada para expressar de forma estável um sistema de empacotamento retroviral anfotrópico. Esta linha celular é amplamente utilizada na terapia genética e na investigação em biologia molecular como produtora de retrovírus recombinantes capazes de transduzir uma vasta gama de células de mamíferos. A PA317 deriva de fibroblastos NIH/3T3 e mantém a morfologia de um fibroblasto, ao mesmo tempo que demonstra a capacidade de produzir retrovírus de elevado título.

As células PA317 foram concebidas para fornecer componentes retrovirais essenciais in trans, incluindo os genes gag, pol e env, sem, no entanto, conterem sequências virais com capacidade de replicação. Isto garante a segurança em contextos experimentais e terapêuticos, impedindo a formação de retrovírus com capacidade de replicação. A proteína de envelope anfotrópica expressa pelas células PA317 permite que os retrovírus produzidos infetem uma gama diversificada de tipos de células em diferentes espécies, tornando esta linha celular particularmente valiosa para aplicações que requerem uma transferência genética eficiente.

Esta linha celular é frequentemente utilizada para produzir vetores retrovirais para a entrega de genes em estudos pré-clínicos, incluindo investigação oncológica, engenharia genética e medicina regenerativa. É também a escolha preferida para validar construções de vetores retrovirais e otimizar protocolos de produção viral. A PA317 proporciona uma plataforma fiável para a transferência genética mediada por retrovírus, apoiando os avanços na terapia genética e na investigação em genómica funcional.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia