PA317

PA317 er en fibroblastcellelinje fra mus som er genetisk modifisert til å uttrykke et amfotropisk retroviralt pakkesystem på en stabil måte. Denne cellelinjen brukes mye innen genterapi og molekylærbiologisk forskning som produsent av rekombinante retrovirus som er i stand til å infisere et bredt spekter av pattedyrceller. PA317 stammer fra NIH/3T3-fibroblaster og beholder en fibroblastmorfologi samtidig som den viser evne til å produsere retrovirus med høy titer.

PA317-celler er utformet for å levere essensielle retrovirale komponenter trans, inkludert gag-, pol- og env-gener, samtidig som de mangler replikasjonskompetente virussekvenser. Dette sikrer sikkerhet i eksperimentelle og terapeutiske sammenhenger ved å forhindre dannelsen av replikasjonskompetente retrovirus. Det amfotrope hylleproteinet som uttrykkes av PA317-celler gjør at de produserte retrovirusene kan infisere et bredt spekter av celletyper på tvers av ulike arter, noe som gjør denne cellelinjen særlig verdifull for anvendelser som krever effektiv genoverføring.

Denne cellelinjen brukes ofte til å produsere retrovirale vektorer for genoverføring i prekliniske studier, blant annet innen kreftforskning, genteknologi og regenerativ medisin. Den er også et foretrukket valg for validering av retrovirale vektorkonstruksjoner og optimalisering av protokoller for virusproduksjon. PA317 utgjør en pålitelig plattform for retrovirusmediert genoverføring og bidrar til fremskritt innen genterapi og funksjonell genomforskning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring