Pereiti prie turinio
PA317
Audinys
Embrionas
Sinonimai
pA317

Dokumentai

PA317

Cell line · Prekės numeris 305617

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

PA317 – tai pelių fibroblastų ląstelių linija, genetiškai modifikuota taip, kad stabiliai ekspresuotų amfotropinę retrovirusų pakavimo sistemą. Ši ląstelių linija plačiai naudojama genų terapijos ir molekulinės biologijos tyrimuose kaip rekombinantinių retrovirusų, galinčių transdukuoti platų žinduolių ląstelių spektrą, gamintoja. PA317 yra išvestas iš NIH/3T3 fibroblastų ir išlaiko fibroblastų morfologiją, tuo pačiu pasižymėdamas gebėjimu gaminti didelio titro retrovirusus.

PA317 ląstelės yra sukurtos taip, kad teiktų esminius retrovirusinius komponentus trans būdu, įskaitant gag, pol ir env genus, tačiau neturi replikacijai tinkamų virusinių sekų. Tai užtikrina saugumą eksperimentiniuose ir terapiniuose kontekstuose, užkertant kelią replikacijai tinkamų retrovirusų susidarymui. PA317 ląstelėse ekspresuojamas amfotropinis apvalkalo baltymas leidžia pagamintiems retrovirusams užkrėsti įvairių rūšių ląstelių tipus, todėl ši ląstelių linija yra ypač vertinga taikymams, kuriuose reikalingas efektyvus genų perkėlimas.

Ši ląstelių linija dažniausiai naudojama retrovirusiniams vektoriams, skirtiems genų perdavimui, gaminti ikiklinikiniuose tyrimuose, įskaitant vėžio tyrimus, genetinę inžineriją ir regeneracinę mediciną. Ji taip pat yra pirmenybinis pasirinkimas retrovirusinių vektorių konstrukcijų patvirtinimui ir virusų gamybos protokolų optimizavimui. PA317 suteikia patikimą platformą retrovirusų tarpininkaujamam genų perkėlimui, prisidėdama prie pažangos genų terapijos ir funkcinės genomikos tyrimų srityse.

Audinys
Embrionas
Paraiškos
3D ląstelių kultūra
Sinonimai
  • pA317

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This PA317 retroviral packaging line contains MoMLV gag/pol/env components enabling production of replication-defective retroviral particles. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
PA317 (Cytion katalogo numeris 305617)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_3920

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Moloney pelių leukemijos virusas (MoMLV)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tada visiškai užtepkite "TrypLE Express", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
NIH Šveicarija

10Produkto aprašymas

Sudėties lentelė