PA317
Cell line · Toote number 305617
Kohandamine / Soovitused
- PA317Cell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
PA317 on hiire fibroblastide rakuliin, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib stabiilselt amfotroopset retroviiruse pakkimissüsteemi. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt geeniteraapias ja molekulaarbioloogia uuringutes rekombinantseid retroviiruseid tootva rakuliinina, mis suudab nakatada laia valikut imetajate rakke. PA317 on saadud NIH/3T3 fibroblastidest ja säilitab fibroblastide morfoloogia, olles samas võimeline tootma kõrge tiitriga retroviiruseid.
PA317 rakud on loodud pakkuma olulisi retroviiruslikke komponente trans-vormis, sealhulgas gag-, pol- ja env-geene, kuid neil puuduvad replikatsioonivõimelised viirusjärjestused. See tagab ohutuse nii eksperimentaalsetes kui ka terapeutilistes kontekstides, takistades replikatsioonivõimeliste retroviiruste teket. PA317 rakkudes ekspresseeritud amfotroopne ümbrisvalk võimaldab toodetud retroviirustel nakatada mitmesuguseid rakutüüpe erinevatel liikidel, mistõttu on see rakuliin eriti väärtuslik rakendustes, mis nõuavad tõhusat geenisiiret.
Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt retroviirusvektorite tootmiseks geenide edastamiseks prekliinilistes uuringutes, sealhulgas vähiuuringutes, geenitehnoloogias ja regeneratiivses meditsiinis. Samuti on see eelistatud valik retroviirusvektori konstruktide valideerimiseks ja viiruslike tootmisprotokollide optimeerimiseks. PA317 pakub usaldusväärset platvormi retroviiruste vahendatud geenisiirdamiseks, toetades edusamme geeniteraapias ja funktsionaalse genoomika uurimistöös.
- Kude
- Embrüo
- Rakendused
- 3D rakukultuur
- Sünonüümid
- pA317
02Klassifikatsioon
- Organism
- Hiir
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This PA317 retroviral packaging line contains MoMLV gag/pol/env components enabling production of replication-defective retroviral particles. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 2
03Omadused
- Morfoloogia
- Fibroblastilaadsed
- Rakutüüp
- Fibroblastide
04Tunnused
- Viide
- PA317 (Cytioni katalooginumber 305617)
- NCBI maksukood
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3920
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Viirused
- Moloney hiire leukeemiaviirus (MoMLV)
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Tõug / alamliik
- NIH Swiss
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
10Toote üksikasjad
- Koostis tabel
