PA317

PA317 is een fibroblastcellijn van muizen die genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een amfotropisch retroviraal verpakkingssysteem tot expressie te brengen. Deze cellijn wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek op het gebied van gentherapie en moleculaire biologie als producent van recombinante retrovirussen die in staat zijn een breed scala aan zoogdiercellen te transduceren. PA317 is afgeleid van NIH/3T3-fibroblasten en behoudt de morfologie van fibroblasten, terwijl het tegelijkertijd het vermogen vertoont om retrovirussen met een hoge titer te produceren.

PA317-cellen zijn ontworpen om essentiële retrovirale componenten trans aan te leveren, waaronder gag-, pol- en env-genen, terwijl ze geen replicatiecompetente virussequenties bevatten. Dit waarborgt de veiligheid in experimentele en therapeutische contexten door de vorming van replicatiecompetente retrovirussen te voorkomen. Het door PA317-cellen tot expressie gebrachte amfotrope envelopeiwit stelt de geproduceerde retrovirussen in staat een breed scala aan celtypen bij verschillende soorten te infecteren, waardoor deze cellijn bijzonder waardevol is voor toepassingen die een efficiënte genoverdracht vereisen.

Deze cellijn wordt vaak gebruikt voor de productie van retrovirale vectoren voor genafgifte in preklinische studies, waaronder kankeronderzoek, genetische manipulatie en regeneratieve geneeskunde. Het is tevens een voorkeurskeuze voor het valideren van retrovirale vectorconstructies en het optimaliseren van virale productieprotocollen. PA317 biedt een betrouwbaar platform voor door retrovirussen gemedieerde genoverdracht en ondersteunt daarmee vooruitgang in gentherapie en functioneel genomisch onderzoek.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring