PSN-1

01Description

02General information

Description

La lignée cellulaire PSN-1 est un modèle d’adénocarcinome pancréatique humain issu d’une tumeur pancréatique primaire. Elle se distingue notamment par la présence d’amplifications à la fois de l’oncogène c-myc et du gène c-Ki-ras, ce dernier présentant une mutation ponctuelle au codon 12. Cette mutation remplace la glycine par l’arginine (GGT à CGT), ce qui conduit à une forme activée de c-Ki-ras dotée d’un potentiel de transformation. La lignée PSN-1 conserve les mêmes caractéristiques moléculaires que le tissu tumoral d’origine, notamment une amplification par 50 du gène c-myc et une amplification de 3 à 6 fois du gène c-Ki-ras muté. Ces amplifications oncogéniques s’accompagnent d’une augmentation significative de l’expression de l’ARNm pour ces deux gènes, ce qui suggère leur rôle crucial dans la progression tumorale.

La lignée PSN-1 a été obtenue par un processus non conventionnel au cours duquel des tissus tumoraux congelés, conservés pendant un an et demi à -80 °C sans agents de cryoconservation, ont été transplantés avec succès chez des souris nues. À partir de la xénogreffe ainsi obtenue, la lignée cellulaire PSN-1 a été établie et a démontré des amplifications oncogéniques stables in vitro, reflétant celles observées dans la tumeur d’origine et ses ganglions lymphatiques métastatiques. La lignée cellulaire présente des caractéristiques de croissance hétérogènes : les cellules peuvent soit adhérer fortement sous forme de monocouches, soit se développer en suspension. Ce double comportement reflète une population cellulaire diversifiée, capable de s’adapter à différentes conditions de culture.

Tissue

Pancréas

Disease

Adénocarcinome pancréatique

Applications

Culture cellulaire en 3D

Synonyms

• PSN1

03Classification

Organism

Human

Sex

Male

Growth properties

Adherent

Biosafety level

1

04Characteristics

Morphology

De type épithélial

Cell type

Cellule épithéliale

Doubling time

21 heures

05Identifiers

Citation

PSN-1 (numéro de catalogue Cytion 305618)

NCBI TaxID

9606

Cellosaurus

CVCL_1644

06Expression and susceptibility

Mutational profile

Délétion génique : CDKN2A, homozygote; Délétion génique : SMAD4, homozygote; Mutation : KRAS, simple, p.Gly12Arg (c.34G>C), hétérozygote; Mutation : TP53, simple, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygote

07Handling and culture

Culture medium

RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)

Incubation atmosphere

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

Supplements

Ajouter au milieu 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur

Dissociation reagent

Accutase

Fluid renewal

2 à 3 fois par semaine

Thawing and culturing

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium

Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.

Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

09Donor

Donor age

Non précisé

Ethnicity

Asie de l'Est

10Legal and safety

Safety precautions

Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.

Warranty

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.

Material Transfer Agreement required

Yes