Siirry sisältöön
PSN-1
Kudos
Haima
Sairaus
Haiman adenokarsinooma
Synonyymit
PSN1

Asiakirjat

PSN-1

Cell line · Tuotenumero 305618

PSN-1-solulinja on ihmisen haiman adenokarsinooman malli, joka on kehitetty primaarisesta haimakasvaimesta. Se on erityisen merkittävä, koska siinä esiintyy amplifikaatioita...

€420.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Kuvaus

02Yleistä tietoa

Kuvaus

PSN-1-solulinja on ihmisen haiman adenokarsinooman malli, joka on kehitetty primaarisesta haimakasvaimesta. Se on erityisen merkittävä, koska siinä esiintyy sekä c-myc-onkogeenin amplifikaatioita että c-Ki-ras-geenin amplifikaatioita, joissa on pistemutaatio kodonissa 12. Tässä mutaatiossa glysiini korvautuu arginiinilla (GGT muuttuu CGT:ksi), mikä johtaa c-Ki-ras-geenin aktivoituneeseen muotoon, jolla on transformoiva potentiaali. PSN-1:llä on samat molekyyliset ominaisuudet kuin alkuperäisellä kasvainkudoksella, mukaan lukien c-myc-geenin 50-kertainen amplifikaatio ja mutatoituneen c-Ki-ras-geenin 3–6-kertainen amplifikaatio. Näihin onkogeenisiin amplifikaatioihin liittyy molempien geenien merkittävästi lisääntynyt mRNA-ilmentyminen, mikä viittaa niiden ratkaisevaan rooliin kasvaimen etenemisessä.

PSN-1 johdettiin epätavallisella menetelmällä, jossa pakastettuja kasvainkudoksia, joita oli säilytetty 1,5 vuotta -80 °C:ssa ilman kryosäilytysaineita, siirrettiin onnistuneesti alastomille hiirille. Tuloksena saadusta ksenotransplantaatista perustettiin PSN-1-solulinja, joka osoitti in vitro vakaita onkogeenisiä amplifikaatioita, jotka vastasivat alkuperäisessä kasvaimessa ja sen metastaattisissa imusolmukkeissa havaittuja amplifikaatioita. Solulinjalla on heterogeeniset kasvun ominaisuudet: solut joko tarttuvat voimakkaasti monokerroksiksi tai kasvavat suspensiossa. Tämä kaksijakoinen käyttäytyminen kuvastaa monimuotoista solupopulaatiota, joka kykenee sopeutumaan erilaisiin viljelyolosuhteisiin.

Kudos
Haima
Sairaus
Haiman adenokarsinooma
Sovellukset
3D-soluviljely
Synonyymit
  • PSN1

03Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

04Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolu
Kaksinkertaistumisaika
21 tuntia

05Tunnisteet

Lähdeviite
PSN-1 (Cytionin tuotenumero 305618)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Geenipoisto: CDKN2A, homotsygoottinen; Geenipoisto: SMAD4, homotsygoottinen; Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterotsygoottinen; Mutaatio: TP53, yksinkertainen, p.Lys132Gln (c.394A>C), homotsygootti

07Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

09Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Määrittelemätön
Etnisyys
Itä-Aasia