PSN-1

01Kirjeldus

02Üldine teave

Kirjeldus

PSN-1 rakuliin on inimese pankrease adenokartsinoomi mudel, mis on loodud primaarse pankrease kasvaja põhjal. See on eriti märkimisväärne selle poolest, et selles esinevad nii c-myc-onkogeeni kui ka c-Ki-ras-geeni amplifikatsioonid koos punktmutatsiooniga kodonis 12. See mutatsioon asendab glütsiini arginiiniga (GGT asendub CGT-ga), mille tulemusena tekib c-Ki-ras-i aktiveeritud vorm, millel on transformatsioonipotentsiaal. PSN-1 säilitab samad molekulaarsed omadused kui algne kasvajakude, sealhulgas c-myc 50-kordse amplifikatsiooni ja muteerunud c-Ki-ras 3–6-kordse amplifikatsiooni. Nendele onkogeensetele amplifikatsioonidele kaasneb mõlema geeni märkimisväärselt suurenenud mRNA ekspressioon, mis viitab nende otsustavale rollile kasvaja progresseerumisel.

PSN-1 saadi ebatraditsioonilise protsessi abil, mille käigus külmutatud kasvajakoed, mida oli säilitatud 1,5 aastat temperatuuril –80 °C ilma krüokonserveerimisaineteta, siirdati edukalt alasti hiirtele. Saadud ksenotransplantaadist loodi PSN-1 rakuliin, mis näitas in vitro stabiilseid onkogeenseid amplifikatsioone, mis peegeldasid algses kasvajas ja selle metastaatilistes lümfisõlmedes leiduvaid amplifikatsioone. Rakuliinil on heterogeensed kasvutunnused: rakud võivad kas tugevalt kinnituda monokihina või kasvada suspensioonis. See kahepoolne käitumine peegeldab mitmekesist rakupopulatsiooni, mis suudab kohaneda erinevate kultiveerimistingimustega.

Kude

Pankreas

Haigus

Pankrease adenokartsinoom

Rakendused

3D rakukultuur

Sünonüümid

• PSN1

03Klassifikatsioon

Organism

Inimene

Sugu

Mees

Kasvuvõime

Järgija

Bioloogilise ohutuse tase

1

04Omadused

Morfoloogia

Epiteelilaadsed

Rakutüüp

Epiteelirakk

Kahekordistumisaeg

21 tundi

05Tunnused

Viide

PSN-1 (Cytioni katalooginumber 305618)

NCBI maksukood

9606

Cellosaurus

CVCL_1644

06Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil

Geeni deleetsioon: CDKN2A, homosügootne; Geeni deleetsioon: SMAD4, homosügootne; Mutatsioon: KRAS, lihtne, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterosügootne; Mutatsioon: TP53, lihtne, p.Lys132Gln (c.394A>C), homosügootne

07Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond

RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)

Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid

Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga

Dissotsiatsioonireaktiiv

Accutase

Vedeliku vahetus

2 kuni 3 korda nädalas

Sulatamine ja kasvatamine

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond

Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.

Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

09Annetaja

Doonori vanus

Täpsustamata

Etniline kuuluvus

Ida-Aasia

10Õiguslikud ja ohutusalased küsimused

Ohutusnõuded

Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.

Garantii

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest

Vajalik on materjalide üleandmise leping

Jah