PSN-1

01Beskrivelse

02Generelle oplysninger

Beskrivelse

PSN-1-cellelinjen er en model for humant adenokarcinom i bugspytkirtlen, der er etableret ud fra en primær tumor i bugspytkirtlen. Den er især kendt for at indeholde amplifikationer af både c-myc-onkogenet og c-Ki-ras-genet med en punktmutation ved kodon 12. Denne mutation erstatter glycin med arginin (GGT til CGT), hvilket fører til en aktiveret form af c-Ki-ras med transformerende potentiale. PSN-1 bevarer de samme molekylære egenskaber som det oprindelige tumorvæv, herunder en 50-fold amplifikation af c-myc og en 3- til 6-fold amplifikation af det muterede c-Ki-ras. Disse onkogene amplifikationer ledsages af en signifikant øget mRNA-ekspression for begge gener, hvilket tyder på deres afgørende rolle i tumorprogression.

PSN-1 blev fremstillet gennem en ukonventionel proces, hvor frosne tumorvæv, der var opbevaret i 1,5 år ved -80 °C uden kryopræserveringsmidler, med succes blev transplanteret til nude-mus. Ud fra det resulterende xenotransplantat blev PSN-1-cellelinjen etableret og viste stabile onkogene amplifikationer in vitro, svarende til dem, der blev fundet i den oprindelige tumor og dens metastatiske lymfeknuder. Cellelinjen udviser heterogene vækstegenskaber, hvor cellerne enten klæber sig stærkt fast som monolag eller vokser i suspension. Denne dobbelte adfærd afspejler en mangfoldig cellepopulation, der er i stand til at tilpasse sig forskellige dyrkningsbetingelser.

Væv

Bugspytkirtel

Sygdom

Adenokarcinom i bugspytkirtlen

Anvendelser

3D-cellekultur

Synonymer

• PSN1

03Klassificering

Organisme

Menneske

Køn

Mand

Vækstegenskaber

Tilhænger

Biosikkerhedsniveau

1

04Egenskaber

Morfologi

Epitel-lignende

Celletype

Epitelcelle

Fordoblingstid

21 timer

05Identifikatorer

Kildehenvisning

PSN-1 (Cytion-katalognummer 305618)

NCBI-skattenummer

9606

Cellosaurus

CVCL_1644

06Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil

Gendeletion: CDKN2A, homozygot; Gendeletion: SMAD4, homozygot; Mutation: KRAS, enkel, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozygot; Mutation: TP53, enkel, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygot

07Håndtering og opdræt

Næringsmedium

RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)

Inkubationsatmosfære

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud

Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS

Dissociationsreagens

Accutase

Væskeudskiftning

2 til 3 gange om ugen

Optøning og dyrkning

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium

Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.

Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

09Donor

Donorens alder

Uspecificeret

Etnisk tilhørsforhold

Østasiatisk

10Juridiske forhold og sikkerhed

Sikkerhedsforanstaltninger

Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.

Garanti

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring

Der kræves en aftale om overførsel af materiale

Ja