PSN-1

01Opis

02Splošne informacije

Opis

Celična linija PSN-1 je model človeškega adenokarcinoma trebušne slinavke, vzpostavljen iz primarnega tumorja trebušne slinavke. Značilna je predvsem po amplifikacijah tako onkogena c-myc kot tudi gena c-Ki-ras s točkovno mutacijo na kodonu 12. Ta mutacija nadomesti glicin z argininom (GGT v CGT), kar vodi do aktivirane oblike c-Ki-ras s transformacijskim potencialom. PSN-1 ohranja enake molekularne značilnosti kot izvorno tumorsko tkivo, vključno s 50-kratno amplifikacijo gena c-myc in 3- do 6-kratno amplifikacijo mutiranega gena c-Ki-ras. Te onkogene amplifikacije spremlja znatno povečana ekspresija mRNA za oba gena, kar kaže na njuno ključno vlogo pri napredovanju tumorja.

PSN-1 je bil pridobljen z nekonvencionalnim postopkom, pri katerem so zamrznjena tumorska tkiva, shranjena 1,5 leta pri -80 °C brez sredstev za krioprezervacijo, uspešno presadili v gole miši. Iz nastalega ksenotransplantata je bila vzpostavljena celična linija PSN-1, ki je in vitro pokazala stabilne onkogene amplifikacije, enake tistim, ki so bile ugotovljene v izvirnem tumorju in njegovih metastaznih limfnih vozlih. Celična linija kaže heterogene značilnosti rasti, pri čemer se celice bodisi močno prilepijo v obliki monosloj bodisi rastejo v suspenziji. To dvojno obnašanje odraža raznoliko celično populacijo, ki se lahko prilagaja različnim kultivnim pogojem.

Tkivo

Trebušna slinavka

Bolezen

Adenokarcinom trebušne slinavke

Uporaba

3D gojenje celic

Sinonimi

• PSN1

03Razvrstitev

Organizem

Človek

Seks

Moški

Lastnosti rasti

Pripadnik

Stopnja biološke varnosti

1

04Značilnosti

Morfologija

Epitelijam podobni

Vrsta celice

Epitelijska celica

Čas podvojitve

21 ur

05Identifikatorji

Navajanje vira

PSN-1 (kataloška številka Cytion 305618)

Davčna identifikacijska številka NCBI

9606

Cellosaurus

CVCL_1644

06Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij

Izpad gena: CDKN2A, homozigotno; Izpad gena: SMAD4, homozigotno; Mutacija: KRAS, preprosta, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozigotno; Mutacija: TP53, preprosta, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozigotna

07Ravnanje in gojenje

Gojišče

RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)

Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila

Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS

Reagenca za disociacijo

Accutase

Obnova tekočine

2 do 3-krat na teden

Odtaljevanje in gojenje

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje

Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.

Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

09Donator

Starost darovalca

Neopredeljeno

Etnična pripadnost

Vzhodna Azija

10Pravne zadeve in varnost

Varnostni ukrepi

Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.

Garancija

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo

Potreben je sporazum o prenosu materiala

Da