PSN-1

01Beskrivelse

02Generell informasjon

Beskrivelse

PSN-1-cellelinjen er en modell for humant adenokarsinom i bukspyttkjertelen, etablert fra en primær svulst i bukspyttkjertelen. Den er særlig kjent for å inneholde amplifikasjoner av både c-myc-onkogenet og c-Ki-ras-genet med en punktmutasjon ved kodon 12. Denne mutasjonen erstatter glycin med arginin (GGT til CGT), noe som fører til en aktivert form av c-Ki-ras med transformerende potensial. PSN-1 beholder de samme molekylære egenskapene som det opprinnelige svulstvevet, inkludert en 50-foldig amplifikasjon av c-myc og en 3- til 6-foldig amplifikasjon av det muterte c-Ki-ras. Disse onkogene amplifikasjonene ledsages av betydelig økt mRNA-ekspresjon for begge genene, noe som tyder på at de spiller en avgjørende rolle i svulstprogresjonen.

PSN-1 ble utviklet gjennom en ukonvensjonell prosess der frosset tumorvev, som hadde vært lagret i 1,5 år ved -80 °C uten kryokonserveringsmidler, ble transplantert med suksess til nakne mus. Fra det resulterende xenotransplantatet ble PSN-1-cellelinjen etablert og viste stabile onkogene amplifikasjoner in vitro, som speiler de som ble funnet i den opprinnelige svulsten og dens metastatiske lymfeknuter. Cellelinjen viser heterogene vekstegenskaper, der cellene enten fester seg sterkt som monolag eller vokser i suspensjon. Denne doble oppførselen gjenspeiler en mangfoldig cellepopulasjon som er i stand til å tilpasse seg ulike dyrkingsforhold.

Vev

Bukspyttkjertelen

Sykdom

Adenokarsinom i bukspyttkjertelen

Søknader

3D-cellekultur

Synonymer

• PSN1

03Klassifisering

Organisme

Menneske

Sex

Mann

Vekstegenskaper

Tilhenger

Biosikkerhetsnivå

1

04Egenskaper

Morfologi

Epitel-lignende

Celletype

Epitelcelle

Fordoblingstid

21 timer

05Identifikatorer

Kildehenvisning

PSN-1 (Cytion-katalognummer 305618)

NCBI-skattenummer

9606

Cellosaurus

CVCL_1644

06Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil

Gendeletjon: CDKN2A, homozygot; Gendeletjon: SMAD4, homozygot; Mutasjon: KRAS, enkel, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozygot; Mutasjon: TP53, enkel, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygot

07Håndtering og kultur

Næringsmedium

RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)

Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd

Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS

Dissosiasjonsmiddel

Accutase

Væskefornyelse

2 til 3 ganger per uke

Tining og dyrking

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium

Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.

Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

09Donor

Donorens alder

Uspesifisert

Etnisitet

Øst-Asia

10Juridisk og sikkerhet

Sikkerhetsregler

Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.

Garanti

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring

Avtale om materialoverføring kreves

Ja