Pāriet uz saturu
PSN-1
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Aizkuņģa dziedzera adenokarcinoma
Sinonīmi
PSN1

Dokumenti

PSN-1

Cell line · Preces numurs 305618

PSN-1 šūnu līnija ir cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas modelis, kas izveidots no primārā aizkuņģa dziedzera audzēja. Tā ir īpaši ievērojama ar to, ka tajā ir amplifikācijas...

€420.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Apraksts

02Vispārīga informācija

Apraksts

PSN-1 šūnu līnija ir cilvēka aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas modelis, kas izveidots no primārā aizkuņģa dziedzera audzēja. Tā ir īpaši ievērojama ar to, ka tajā ir gan c-myc onkogēna, gan c-Ki-ras gēna amplifikācijas ar punktmutāciju 12. kodonā. Šī mutācija aizstāj glicīnu ar arginīnu (GGT ar CGT), izraisot c-Ki-ras aktivēto formu ar transformējošu potenciālu. PSN-1 saglabā tās pašas molekulārās īpašības kā sākotnējais audzēja auds, tostarp 50 reizes palielinātu c-myc ekspresiju un 3–6 reizes palielinātu mutētā c-Ki-ras ekspresiju. Šīs onkogēnās amplifikācijas pavada ievērojami paaugstināta abu gēnu mRNA ekspresija, kas liecina par to izšķirošo lomu audzēja progresēšanā.

PSN-1 tika iegūta, izmantojot netradicionālu procesu, kurā sasaldēti audzēja audi, kas 1,5 gadus bija uzglabāti -80 °C temperatūrā bez krioprezervācijas līdzekļiem, tika veiksmīgi transplantēti kailpeles pelēm. No iegūtā ksenotransplantāta tika izveidota PSN-1 šūnu līnija, kurai in vitro tika konstatētas stabilas onkogēnās amplifikācijas, kas atspoguļoja tās, kas tika atrastas sākotnējā audzējā un tā metastāzēs limfmezglos. Šī šūnu līnija izrāda heterogēnas augšanas īpašības — šūnas vai nu stingri piestiprinās kā monoslāņi, vai aug suspensijā. Šī divkāršā uzvedība atspoguļo daudzveidīgu šūnu populāciju, kas spēj pielāgoties dažādiem kultivēšanas apstākļiem.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Aizkuņģa dziedzera adenokarcinoma
Pieteikumi
3D šūnu kultūras
Sinonīmi
  • PSN1

03Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

04Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
21 stunda

05Identifikatori

Atsauce
PSN-1 (Cytion kataloga numurs 305618)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Gēna delecija: CDKN2A, homozigota; Gēna delecija: SMAD4, homozigota; Mutācija: KRAS, vienkārša, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozigota; Mutācija: TP53, vienkārša, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozigota

07Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

09Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts
Etniskā piederība
Austrumāzijas