PSN-1

01الوصف

02معلومات عامة

الوصف

يُعد خط الخلايا PSN-1 نموذجًا لسرطان الغدة البنكرياسية الغدي البشري، تم إنشاؤه من ورم بنكرياسي أولي. ويتميز بشكل خاص باحتوائه على تضخمات لكل من الجين المسرطن c-myc وجين c-Ki-ras مع طفرة نقطية في الكودون 12. هذه الطفرة تستبدل الجليسين بالأرجينين (GGT إلى CGT)، مما يؤدي إلى شكل نشط من c-Ki-ras ذي قدرة تحويلية. يحتفظ PSN-1 بنفس الخصائص الجزيئية التي يتميز بها النسيج الورمي الأصلي، بما في ذلك تضاعف جين c-myc بمقدار 50 ضعفًا وتضاعف جين c-Ki-ras المتحور بمقدار 3 إلى 6 أضعاف. ويصاحب هذه التضاعفات المسببة للسرطان زيادة ملحوظة في التعبير عن الحمض النووي الريبي المرسال (mRNA) لكلا الجينين، مما يشير إلى دورهما الحاسم في تطور الورم.

تم اشتقاق PSN-1 من خلال عملية غير تقليدية حيث تم بنجاح زرع أنسجة ورمية مجمدة، مخزنة لمدة 1.5 سنة عند درجة حرارة -80 درجة مئوية بدون عوامل حفظ بالتبريد، في فئران عارية. ومن الزرع بين الأنواع الناتج، تم إنشاء خط الخلايا PSN-1 وأظهر تضخمات مسرطنة مستقرة في المختبر، مما يعكس تلك الموجودة في الورم الأصلي والعقد الليمفاوية المنتشرة. يُظهر خط الخلايا خصائص نمو غير متجانسة، حيث تلتصق الخلايا بقوة كطبقات أحادية أو تنمو في حالة تعليق. ويعكس هذا السلوك المزدوج مجموعة خلوية متنوعة قادرة على التكيف مع ظروف الاستزراع المختلفة.

الأنسجة

البنكرياس

المرض

سرطان البنكرياس الغدي البنكرياسي

التطبيقات

زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد

المرادفات

• PSN1

03التصنيف

كائن حي

إنسان

الجنس

ذكر

خصائص النمو

الملتزم

مستوى السلامة البيولوجية

1

04الخصائص

المورفولوجيا

شبيه بالظهارة

نوع الخلية

الخلية الظهارية

زمن المضاعفة

21 ساعة

05المعرّفات

المرجع

PSN-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305618)

رقم التعريف الضريبي لدى NCBI

9606

سيلوصور

CVCL_1644

06التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة

حذف جيني: CDKN2A، متماثل؛ حذف جيني: SMAD4، متماثل؛ طفرة: KRAS، بسيطة، p.Gly12Arg (c.34G>C)، غير متماثل؛ طفرة: TP53، بسيطة، p.Lys132Gln (c.394A>C)، متماثل

07التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع

RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)

بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية

إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط

كاشف التفكك

أكوتاس

تجديد السوائل

2 إلى 3 مرات في الأسبوع

إذابة الثلج والزراعة

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد

كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.

شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

09المانح

عمر المتبرع

غير محدد

الأصل العرقي

شرق آسيا

10الشؤون القانونية والسلامة

احتياطات السلامة

عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.

الضمان

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان

يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد

نعم