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PSN-1
Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse
Synonyme
PSN1

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PSN-1

Cell line · Artikelnummer 305618

Die Zelllinie PSN-1 ist ein Modell für ein humanes Pankreasadenokarzinom, das aus einem primären Pankreastumor etabliert wurde. Sie zeichnet sich insbesondere dadurch aus, dass sie eine Amplifikation von … aufweist.

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01Beschreibung

02Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie PSN-1 ist ein Modell für ein humanes Pankreasadenokarzinom, das aus einem primären Pankreastumor etabliert wurde. Sie zeichnet sich insbesondere dadurch aus, dass sie Amplifikationen sowohl des c-myc-Onkogens als auch des c-Ki-ras-Gens mit einer Punktmutation am Codon 12 aufweist. Bei dieser Mutation wird Glycin durch Arginin ersetzt (GGT zu CGT), was zu einer aktivierten Form von c-Ki-ras mit transformierendem Potenzial führt. PSN-1 weist dieselben molekularen Eigenschaften wie das ursprüngliche Tumorgewebe auf, darunter eine 50-fache Amplifikation von c-myc und eine 3- bis 6-fache Amplifikation des mutierten c-Ki-ras. Diese onkogenen Amplifikationen gehen mit einer deutlich erhöhten mRNA-Expression beider Gene einher, was auf ihre entscheidende Rolle bei der Tumorprogression hindeutet.

PSN-1 wurde durch ein unkonventionelles Verfahren gewonnen, bei dem gefrorenes Tumorgewebe, das 1,5 Jahre lang ohne Kryokonservierungsmittel bei -80 °C gelagert worden war, erfolgreich in Nacktmäuse transplantiert wurde. Aus dem daraus entstandenen Xenotransplantat wurde die PSN-1-Zelllinie etabliert, die in vitro stabile onkogene Amplifikationen aufwies, die denen im ursprünglichen Tumor und seinen metastasierten Lymphknoten entsprachen. Die Zelllinie weist heterogene Wachstumseigenschaften auf: Die Zellen haften entweder stark als Monoschicht oder wachsen in Suspension. Dieses duale Verhalten spiegelt eine vielfältige Zellpopulation wider, die sich an unterschiedliche Kulturbedingungen anpassen kann.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse
Anwendungen
3D-Zellkultur
Synonyme
  • PSN1

03Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

04Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzelle
Verdopplungszeit
21 Stunden

05Bezeichner

Quellenangabe
PSN-1 (Cytion-Katalognummer 305618)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Gendeletion: CDKN2A, homozygot; Gendeletion: SMAD4, homozygot; Mutation: KRAS, einfach, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozygot; Mutation: TP53, einfach, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygot

07Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

09Spender

Alter des Spenders
Nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Ostasiatisch