Przejdź do treści
PSN-1
Chusteczka
Trzustka
Choroba
Gruczolakorak trzustki
Synonimy
PSN1

Dokumenty

PSN-1

Cell line · Numer produktu 305618

Linia komórkowa PSN-1 stanowi model ludzkiego gruczolakoraka trzustki, wyhodowany z pierwotnego guza trzustki. Wyróżnia się ona przede wszystkim obecnością amplifikacji...

€420.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Opis

02Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa PSN-1 stanowi model ludzkiego gruczolakoraka trzustki, wyhodowany z pierwotnego guza trzustki. Wyróżnia się ona w szczególności obecnością amplifikacji zarówno onkogenu c-myc, jak i genu c-Ki-ras z mutacją punktową w kodonie 12. Mutacja ta polega na zastąpieniu glicyny argininą (GGT na CGT), co prowadzi do powstania aktywowanej formy c-Ki-ras o potencjale transformującym. Linia PSN-1 zachowuje te same cechy molekularne, co pierwotna tkanka nowotworowa, w tym 50-krotną amplifikację genu c-myc oraz 3- do 6-krotną amplifikację zmutowanego genu c-Ki-ras. Tym amplifikacjom onkogennym towarzyszy znacznie zwiększona ekspresja mRNA obu genów, co sugeruje ich kluczową rolę w progresji nowotworu.

Linia PSN-1 została uzyskana w wyniku niekonwencjonalnego procesu, w ramach którego zamrożone tkanki nowotworowe, przechowywane przez 1,5 roku w temperaturze -80°C bez środków kriokonserwujących, zostały z powodzeniem przeszczepione myszom nagim. Z powstałego przeszczepu heterogenicznego wyizolowano linię komórkową PSN-1, która wykazała stabilne amplifikacje onkogenne in vitro, odzwierciedlające te stwierdzone w pierwotnym guzie i jego przerzutowych węzłach chłonnych. Linia komórkowa wykazuje heterogeniczne cechy wzrostu – komórki mogą albo silnie przylegać, tworząc monowarstwy, albo rosnąć w zawiesinie. To dwojakie zachowanie odzwierciedla zróżnicowaną populację komórek zdolną do adaptacji do różnych warunków hodowli.

Chusteczka
Trzustka
Choroba
Gruczolakorak trzustki
Zastosowania
hodowla komórek 3D
Synonimy
  • PSN1

03Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

04Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórka nabłonkowa
Czas podwojenia
21 godzin

05Identyfikatory

Źródło
PSN-1 (numer katalogowy Cytion 305618)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Delecja genu: CDKN2A, homozygotyczna; Delecja genu: SMAD4, homozygotyczna; Mutacja: KRAS, prosta, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozygotyczna; Mutacja: TP53, prosta, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygotyczna

07Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

09Darczyńca

Wiek dawcy
Nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Azja Wschodnia