Ga naar de inhoud
PSN-1
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Pancreas adenocarcinoom
Synoniemen
PSN1

Documenten

PSN-1

Cell line · Productnummer 305618

De PSN-1-cellijn is een model van humaan pancreasadenocarcinoom dat is ontwikkeld op basis van een primaire pancreastumor. Deze cellijn valt met name op door de aanwezigheid van amplificaties...

€420.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Beschrijving

02Algemene informatie

Beschrijving

De PSN-1-cellijn is een model van humaan pancreasadenocarcinoom dat is ontwikkeld op basis van een primaire pancreastumor. Deze lijn valt met name op door de aanwezigheid van amplificaties van zowel het c-myc-oncogen als het c-Ki-ras-gen met een puntmutatie op codon 12. Bij deze mutatie wordt glycine vervangen door arginine (GGT naar CGT), wat leidt tot een geactiveerde vorm van c-Ki-ras met transformerend potentieel. PSN-1 behoudt dezelfde moleculaire kenmerken als het oorspronkelijke tumorweefsel, waaronder een 50-voudige amplificatie van c-myc en een 3- tot 6-voudige amplificatie van het gemuteerde c-Ki-ras. Deze oncogene amplificaties gaan gepaard met een aanzienlijk verhoogde mRNA-expressie voor beide genen, wat wijst op hun cruciale rol in de tumorprogressie.

PSN-1 is afgeleid via een onconventioneel proces waarbij bevroren tumorweefsels, die 1,5 jaar bij -80 °C zonder cryopreservatiemiddelen waren opgeslagen, met succes in naakte muizen werden getransplanteerd. Uit de resulterende xenotransplantaat werd de PSN-1-cellijn opgericht, die in vitro stabiele oncogene amplificaties vertoonde, die overeenkwamen met die welke werden aangetroffen in de oorspronkelijke tumor en de uitgezaaide lymfeklieren. De cellijn vertoont heterogene groeikenmerken: de cellen hechten zich ofwel sterk als monolaag of groeien in suspensie. Dit dubbele gedrag weerspiegelt een diverse celpopulatie die zich kan aanpassen aan verschillende kweekomstandigheden.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Pancreas adenocarcinoom
Toepassingen
3D-celcultuur
Synoniemen
  • PSN1

03Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

04Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcel
Verdubbelingstijd
21 uur

05Identificatiegegevens

Bronvermelding
PSN-1 (Cytion-catalogusnummer 305618)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Gendeletie: CDKN2A, homozygoot; Gendeletie: SMAD4, homozygoot; Mutatie: KRAS, enkelvoudig, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozygoot; Mutatie: TP53, eenvoudig, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozygoot

07Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

09Donateur

Leeftijd van de donor
Ongespecificeerd
Etnische afkomst
Oost-Aziatisch