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PSN-1
Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma do pâncreas
Sinónimos
PSN1

Documentos

PSN-1

Cell line · Número do produto 305618

A linha celular PSN-1 é um modelo de adenocarcinoma pancreático humano estabelecido a partir de um tumor pancreático primário. Destaca-se, em particular, por apresentar ampliação...

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Personalização / Recomendações

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  • CoA
1

01Descrição

02Informações gerais

Descrição

A linha celular PSN-1 é um modelo de adenocarcinoma pancreático humano estabelecido a partir de um tumor pancreático primário. Destaca-se particularmente por apresentar amplificações tanto do oncogene c-myc como do gene c-Ki-ras, com uma mutação pontual no códon 12. Esta mutação substitui a glicina pela arginina (GGT por CGT), levando a uma forma ativada do c-Ki-ras com potencial transformador. A PSN-1 mantém as mesmas características moleculares do tecido tumoral original, incluindo uma amplificação 50 vezes superior do c-myc e uma amplificação de 3 a 6 vezes superior do c-Ki-ras mutado. Estas amplificações oncogénicas são acompanhadas por um aumento significativo da expressão de ARNm de ambos os genes, sugerindo o seu papel crítico na progressão tumoral.

A PSN-1 foi obtida através de um processo não convencional, no qual tecidos tumorais congelados, armazenados durante 1,5 anos a -80 °C sem agentes de criopreservação, foram transplantados com sucesso para ratos nude. A partir do xenoenxerto resultante, foi estabelecida a linha celular PSN-1, que demonstrou amplificações oncogénicas estáveis in vitro, espelhando as encontradas no tumor original e nos seus gânglios linfáticos metastáticos. A linha celular apresenta características de crescimento heterogéneas, com as células a aderirem fortemente como monocamadas ou a crescerem em suspensão. Este comportamento duplo reflete uma população celular diversificada, capaz de se adaptar a diferentes condições de cultura.

Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma do pâncreas
Aplicações
cultura de células 3D
Sinónimos
  • PSN1

03Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

04Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Célula epitelial
Tempo de duplicação
21 horas

05Identificadores

Referência
PSN-1 (número de catálogo da Cytion 305618)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1644

06Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Deleção do gene: CDKN2A, homozigótica; Deleção do gene: SMAD4, homozigótica; Mutação: KRAS, simples, p.Gly12Arg (c.34G>C), heterozigótica; Mutação: TP53, simples, p.Lys132Gln (c.394A>C), homozigótica

07Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

09Doador

Idade do dador
Não especificado
Etnia
Ásia Oriental