iPSC-hDPSC

קו התאים iPSC-hDPSC מייצג מודל חדשני שמקורו בתאי גזע של מוך השן האנושי (hDPSCs). תאים אלה מקורם ברקמת מוך השן, שם הם עוברים עיכול אנזימטי כדי לבודד את החלק הדבוק. עם הגעתם ל-70-80% צפיפות, התאים עוברים תרבית משנה ונשמרים בהקפאה במעבר 1. שלב בסיסי זה הוא קריטי לשמירה על שלמות התאים ולהבטחת חיוניותם של תאי הגזע ליישומים עתידיים.

תכנות מחדש של hDPSCs לתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים (iPSCs) הוא התקדמות משמעותית, המושגת באמצעות טכניקת תכנות מחדש אפיסומלית. שיטה זו משתמשת בווקטורים המשלבים את גורמי Yamanaka - Oct-4, Sox-2 ו-Klf-4 - יחד עם p53 Anti-sense, EBNA-1 וסימן חלבון פלואורסצנטי אדום. הגישה האפיסומית היא יתרון משמעותי, שכן היא מונעת את שילוב גורמי התכנות מחדש בגנום, ובכך משמרת את היציבות הגנטית של ה-iPSCs. קו ה-iPSC-hDPSC המתקבל מציג מאפיינים פלוריפוטנטיים, מה שהופך אותו לכלי חשוב למחקר ברפואה רגנרטיבית, מודלים של מחלות וגילוי תרופות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

כדי לשפר את תהליך ניתוק התאים ושתילתם מחדש, בצע את השלבים הבאים:

1. הסר את המדיום המשומש ושטוף את התאים ב-PBS (ללא סידן ומגנזיום).
2. הוסף את תמיסת ההפרדה והמתן עד שתפעל בהתאם להוראות היצרן.
3. הוסף בזהירות מדיום טרי לתאים.
4. הפרד את התאים בעדינות כדי להבטיח נזק מינימלי.
5. צפה צלחת תרבית טרייה עם 6 שקעים בוויטרונקטין וזרע את התאים המופרדים בשני שקעים להמשך התרבות.

כדי להבטיח צמיחת תאים אופטימלית ועקביות ניסויית, מומלץ להשתמש בצפיפות זריעה של 5,000 עד 10,000 תאים/סמ"ר לאחר שהתאים הסתגלו לתנאי התרבית.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו