iPSC-hDPSC

iPSC-hDPSC細胞株は、ヒト歯髄幹細胞（hDPSC）由来の最先端モデルである。これらの細胞は歯髄組織に由来し、そこで酵素消化を受けて接着画分を分離する。70-80％のコンフルエントに達した時点で、細胞は継代培養され、Passage 1で凍結保存される。この基礎となるステップは、細胞の完全性を維持し、将来の応用のために幹細胞の生存性を確保する上で極めて重要である。

hDPSCを人工多能性幹細胞（iPSC）に初期化することは、エピソーム初期化技術によって達成される重要な進歩である。この方法は、p53アンチセンス、EBNA-1、赤色蛍光タンパク質マーカーとともに、山中因子-Oct-4、Sox-2、Klf-4を組み込んだベクターを用いる。エピソームアプローチは、リプログラミング因子のゲノムへの統合を回避し、iPSCの遺伝的安定性を保つという点で特に有利である。その結果、iPSC-hDPSC株は多能性を示し、再生医療、疾患モデリング、創薬研究のための貴重なツールとなる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

細胞の剥離と再播種のプロセスを改善するには、以下の手順に従う：

1. 使用済み培地を除去し、細胞をPBS（カルシウムとマグネシウ ムを含まない）ですすぐ。
2. 剥離液を加え、製造元の指示通りに作用させる。
3. 新しいメデュームを注意深く細胞に加える。
4. 損傷を最小限にするため、細胞を静かに解離させる。
5. 新しい6ウェル培養プレートにビトロネクチンをコートし、解離した細胞を2つのウェルに播種してさらに培養する。

最適な細胞増殖と実験の一貫性を確保するために、 細胞が培養条件に適応したら、5,000～10,000個/cm² の播種密度を使用することを推奨します。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。