iPSC-hDPSC

สายเซลล์ iPSC-hDPSC เป็นแบบจำลองล้ำสมัยที่ได้มาจากเซลล์ต้นกำเนิดของเนื้อเยื่อฟันมนุษย์ (hDPSCs) เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อฟัน ซึ่งผ่านกระบวนการย่อยด้วยเอนไซม์เพื่อแยกส่วนที่เกาะติดออกมาเมื่อเซลล์เติบโตจนมีความหนาแน่นถึง 70-80% จะทำการแยกเซลล์และเก็บรักษาในสภาพแช่แข็งที่รุ่นเพาะเลี้ยงที่ 1 ขั้นตอนพื้นฐานนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการรักษาความสมบูรณ์ของเซลล์และรับประกันความมีชีวิตของเซลล์ต้นกำเนิดสำหรับการนำไปใช้ในอนาคต

การโปรแกรมใหม่ของเซลล์ต้นกำเนิดจากฟันน้ำนมของมนุษย์ (hDPSCs) ให้กลายเป็นเซลล์ต้นกำเนิดที่มีศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ชนิดใดก็ได้ (iPSCs) ถือเป็นความก้าวหน้าสำคัญ ซึ่งสำเร็จได้ผ่านเทคนิคการโปรแกรมแบบอีพิโซมอล วิธีการนี้ใช้เวกเตอร์ที่บรรจุปัจจัยยามาเนกา (Yamanaka factors) ได้แก่ Oct-4, Sox-2 และ Klf-4 ร่วมกับ p53 Anti-sense, EBNA-1 และตัวบ่งชี้โปรตีนเรืองแสงสีแดงแนวทางแบบอีพิโซมมีข้อได้เปรียบเป็นพิเศษเนื่องจากหลีกเลี่ยงการรวมปัจจัยการโปรแกรมใหม่เข้ากับจีโนม จึงรักษาเสถียรภาพทางพันธุกรรมของ iPSC ไว้ได้ สายพันธุ์ iPSC-hDPSC ที่ได้แสดงลักษณะความเป็นพหุศักยภาพ ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยในด้านการแพทย์ฟื้นฟู การสร้างแบบจำลองโรค และการค้นคว้ายา

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

เพื่อปรับปรุงกระบวนการแยกเซลล์และการเพาะเมล็ดใหม่ ให้ทำตามขั้นตอนต่อไปนี้:

1. นำสื่อที่ใช้แล้วออกและล้างเซลล์ด้วย PBS (ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม)
2. เติมน้ำยาละลายและปล่อยให้ทำงานตามคำแนะนำของผู้ผลิต
3. เติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ลงในเซลล์อย่างระมัดระวัง
4. แยกเซลล์อย่างเบามือเพื่อให้เกิดความเสียหายน้อยที่สุด
5. เคลือบจานเพาะเลี้ยงแบบ 6 หลุมใหม่ด้วยวิตโรเนคติน และเพาะเซลล์ที่แยกแล้วลงในหลุมสองหลุมเพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป

เพื่อให้มั่นใจถึงการเจริญเติบโตของเซลล์ที่เหมาะสมและความสม่ำเสมอในการทดลอง แนะนำให้ใช้ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงที่ 5,000 ถึง 10,000 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร เมื่อเซลล์ได้ปรับตัวเข้ากับสภาพแวดล้อมในการเพาะเลี้ยงแล้ว

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.