iPSC-hDPSC

Bunková línia iPSC-hDPSC predstavuje špičkový model odvodený z kmeňových buniek ľudskej zubnej drene (hDPSC). Tieto bunky pochádzajú z tkaniva zubnej drene, kde sa podrobia enzymatickému rozkladu, aby sa izolovala adherentná frakcia. Po dosiahnutí 70 - 80 % konfluencie sa bunky subkultivujú a kryokonzervujú v štádiu 1. Tento základný krok je rozhodujúci pre zachovanie bunkovej integrity a zabezpečenie životaschopnosti kmeňových buniek pre budúce aplikácie.

Významným pokrokom je preprogramovanie hDPSC na indukované pluripotentné kmeňové bunky (iPSC), ktoré sa dosiahlo pomocou techniky epizomálneho preprogramovania. Táto metóda využíva vektory, ktoré obsahujú Yamanaka faktory - Oct-4, Sox-2 a Klf-4 - spolu s p53 Anti-sense, EBNA-1 a markerom červeného fluorescenčného proteínu. Epizómový prístup je obzvlášť výhodný, pretože sa vyhýba integrácii reprogramovacích faktorov do genómu, čím sa zachováva genetická stabilita iPSC. Výsledná línia iPSC-hDPSC vykazuje pluripotentné vlastnosti, čo z nej robí cenný nástroj na výskum v regeneratívnej medicíne, modelovaní chorôb a objavovaní liečiv.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

Ak chcete zlepšiť proces oddeľovania a opätovného nasadenia buniek, postupujte podľa týchto krokov:

1. Odstráňte použité médium a opláchnite bunky PBS (bez vápnika a horčíka).
2. Pridajte oddeľovací roztok a nechajte ho pôsobiť podľa pokynov výrobcu.
3. Opatrne pridajte k bunkám čerstvé médium.
4. Bunky jemne oddeľte, aby sa zabezpečilo ich minimálne poškodenie.
5. Čerstvú 6jamkovú kultivačnú platňu potiahnite vitronectínom a disociované bunky nasaďte do dvoch jamiek na ďalšiu kultiváciu.

Na zabezpečenie optimálneho rastu buniek a experimentálnej konzistencie sa odporúča použiť hustotu výsevu 5 000 až 10 000 buniek/cm², keď sa bunky prispôsobia kultivačným podmienkam.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke