iPSC-hDPSC

IPSC-hDPSC rakuliin kujutab endast tipptasemel mudelit, mis on saadud inimese hambapulpa tüvirakkudest (hDPSC). Need rakud pärinevad hambapulpa koest, kus nad läbivad ensümaatilise lagundamise, et eraldada kleepuv fraktsioon. Pärast 70-80% konfluentsuse saavutamist subkultiveeritakse rakud ja krüokonserveeritakse 1. faasis. See oluline samm on oluline rakkude terviklikkuse säilitamiseks ja tüvirakkude elujõulisuse tagamiseks tulevaste rakenduste jaoks.

HDPSCde ümberprogrammeerimine indutseeritud pluripotentseteks tüvirakkudeks (iPSCd) on märkimisväärne edasiminek, mis saavutatakse episomaalse ümberprogrammeerimise tehnika abil. Selles meetodis kasutatakse vektoreid, mis sisaldavad Yamanaka faktorid - Oct-4, Sox-2 ja Klf-4 - koos p53 Anti-sense, EBNA-1 ja punase fluorestseeriva valgu markeriga. Episomaalne lähenemisviis on eriti soodne, kuna sellega välditakse ümberprogrammeerimisfaktorite integreerimist genoomi, säilitades seega iPSC-de geneetilise stabiilsuse. Saadud iPSC-hDPSC liinil on pluripotentsed omadused, mis muudab selle väärtuslikuks vahendiks regeneratiivse meditsiini, haiguste modelleerimise ja ravimite uurimise jaoks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

Rakkude eraldumise ja uuesti külvamise protsessi parandamiseks järgige järgmisi samme:

1. Eemaldage kasutatud keskkond ja loputage rakke PBS-ga (ilma kaltsiumi ja magneesiumita).
2. Lisage lahus, mis lahutab rakke, ja laske sellel toimida vastavalt tootja juhistele.
3. Lisage rakkudele ettevaatlikult värske söötme.
4. Dissotsieerige rakud ettevaatlikult, et tagada minimaalne kahjustus.
5. Katke värske 6-kujuline kultuurplaat vitronektiiniga ja külvake dissotsieerunud rakud kahte süvendisse edasiseks kasvatamiseks.

Rakkude optimaalse kasvu ja katsete järjepidevuse tagamiseks on soovitatav kasutada külvitihedust 5 000 kuni 10 000 rakku/cm², kui rakud on kohanenud kasvatustingimustega.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest