الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSC) - الخلايا الجذعية المكونة للدم البشرية (hDPSC)

يمثل خط خلايا iPSC-hDPSC نموذجًا متطورًا مشتقًا من الخلايا الجذعية لب الأسنان البشرية (hDPSCs). تنشأ هذه الخلايا من أنسجة لب الأسنان، حيث تخضع لعملية هضم إنزيمي لعزل الجزء الملتصق. عند الوصول إلى نسبة 70-80% من التقاء الخلايا، تتم زراعة الخلايا وحفظها بالتبريد في المرحلة 1. تُعد هذه الخطوة التأسيسية حاسمة في الحفاظ على السلامة الخلوية وضمان صلاحية الخلايا الجذعية للتطبيقات المستقبلية.

تُعد إعادة برمجة الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs) تقدماً هاماً يتم تحقيقه من خلال تقنية إعادة البرمجة الوراثية. وتستخدم هذه الطريقة ناقلات تدمج عوامل ياماناكا -أوكت-4 وسوكس-2 وكلف-4- إلى جانب عامل p53 المضاد للإحساس وEBNA-1 وعلامة البروتين الأحمر الفلوري. ويُعد النهج العرضي مفيداً بشكل خاص لأنه يتجنب دمج عوامل إعادة البرمجة في الجينوم، وبالتالي يحافظ على الاستقرار الجيني للخلايا الجينية المتجانسة iPSCs. يُظهر خط iPSC-hDPSC الناتج خصائص متعددة القدرات، مما يجعله أداة قيّمة للأبحاث في الطب التجديدي ونمذجة الأمراض واكتشاف الأدوية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

لتحسين عملية انفصال الخلايا وإعادة البذر، اتبع الخطوات التالية:

1. إزالة الوسط المستهلك وشطف الخلايا بمحلول PBS (بدون الكالسيوم والمغنيسيوم).
2. أضف محلول الفصل واتركه يعمل وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة.
3. إضافة وسط جديد بعناية إلى الخلايا.
4. قم بفصل الخلايا برفق لضمان الحد الأدنى من التلف.
5. قم بتغطية صفيحة مزرعة جديدة مكونة من 6 خلايا بفيتونيكتين وزرع الخلايا المنفصلة في بئرين لمزيد من الزراعة.

لضمان النمو الأمثل للخلايا والاتساق التجريبي الأمثل، يوصى باستخدام كثافة بذر تتراوح بين 5,000 إلى 10,000 خلية/سم² بمجرد تكيف الخلايا مع ظروف الاستزراع.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان