iPSC-hDPSC

Celična linija iPSC-hDPSC predstavlja vrhunski model, ki izhaja iz matičnih celic človeške zobne pulpe (hDPSC). Te celice izvirajo iz tkiva zobne pulpe, kjer jih encimsko razgradijo in izločijo adherentno frakcijo. Ko dosežejo 70-80-odstotno konfluenco, se celice subkultivirajo in kriokonzervirajo v fazi 1. Ta temeljni korak je ključen za ohranjanje celične celovitosti in zagotavljanje vitalnosti matičnih celic za prihodnje aplikacije.

Reprogramiranje hDPSC v inducirane pluripotentne matične celice (iPSC) je pomemben napredek, dosežen s tehniko epizomalnega reprogramiranja. Pri tej metodi se uporabljajo vektorji, ki vključujejo faktorje Yamanaka - Oct-4, Sox-2 in Klf-4 - skupaj s p53 Anti-sense, EBNA-1 in markerjem rdečega fluorescenčnega proteina. Epizomalni pristop je še posebej ugoden, saj se izogne vključevanju dejavnikov reprogramiranja v genom, s čimer se ohrani genetska stabilnost iPSC. Nastala linija iPSC-hDPSC ima pluripotentne lastnosti, zato je dragoceno orodje za raziskave na področju regenerativne medicine, modeliranja bolezni in odkrivanja zdravil.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

Če želite izboljšati postopek ločevanja in ponovnega naseljevanja celic, upoštevajte naslednje korake:

1. Odstranite porabljeno gojišče in celice sperite s PBS (brez kalcija in magnezija).
2. Dodajte raztopino za ločevanje in počakajte, da deluje v skladu z navodili proizvajalca.
3. Celicam previdno dodajte sveže gojišče.
4. Nežno ločite celice, da zagotovite čim manjše poškodbe.
5. Prevlecite svežo šestdelno ploščo z vitronektinom in posejte disociirane celice v dve vdolbinici za nadaljnje gojenje.

Za zagotovitev optimalne rasti celic in poskusne doslednosti je priporočljivo uporabiti gostoto naselitve 5.000 do 10.000 celic/cm², ko se celice prilagodijo pogojem gojenja.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo