iPSC-hDPSC

IPSC-hDPSC-solulinja edustaa huippuluokan mallia, joka on johdettu ihmisen hammasytimen kantasoluista (hDPSC). Nämä solut ovat peräisin hammasytimen kudoksesta, jossa ne käyvät läpi entsymaattisen pilkkomisen adheerisen fraktion eristämiseksi. Kun solut ovat saavuttaneet 70-80 prosentin konfluenssin, ne subkulturoidaan ja kryosäilytetään Passage 1 -vaiheessa. Tämä perustava vaihe on ratkaisevan tärkeä solujen eheyden säilyttämiseksi ja kantasolujen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tulevia sovelluksia varten.

HDPSC-solujen uudelleenohjelmointi indusoiduiksi pluripotentteiksi kantasoluiksi (iPSC-soluiksi) on merkittävä edistysaskel, joka saavutetaan episomaalisella uudelleenohjelmointitekniikalla. Menetelmässä käytetään vektoreita, jotka sisältävät Yamanaka-tekijät - Oct-4, Sox-2 ja Klf-4 - sekä p53 Anti-sense, EBNA-1 ja punaisen fluoresoivan proteiinin merkkiaineen. Episomaalinen lähestymistapa on erityisen edullinen, koska siinä vältetään uudelleenohjelmointitekijöiden integroituminen genomiin ja säilytetään näin iPSC:iden geneettinen vakaus. Tuloksena syntyneellä iPSC-hDPSC-linjalla on pluripotentteja ominaisuuksia, mikä tekee siitä arvokkaan työkalun regeneratiivisen lääketieteen, sairauksien mallintamisen ja lääkekehityksen tutkimukseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

Paranna solujen irtoamis- ja uudelleen kylvämisprosessia noudattamalla seuraavia ohjeita:

1. Poista käytetty väliaine ja huuhtele solut PBS:llä (ilman kalsiumia ja magnesiumia).
2. Lisää irrotusliuos ja anna sen vaikuttaa valmistajan ohjeiden mukaisesti.
3. Lisää soluihin varovasti tuoretta elatusainetta.
4. Dissosioi solut varovasti varmistaaksesi, että ne vaurioituvat mahdollisimman vähän.
5. Päällystä tuore 6 kuoppalevy vitronektiinillä ja kylvä dissosioituneet solut kahteen kuoppaan jatkoviljelyä varten.

Optimaalisen solukasvun ja kokeiden yhdenmukaisuuden varmistamiseksi suositellaan, että kylvötiheys on 5 000-10 000 solua/cm², kun solut ovat sopeutuneet viljelyolosuhteisiin.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa