iPSC-hDPSC

Η κυτταρική σειρά iPSC-hDPSC αντιπροσωπεύει ένα μοντέλο αιχμής που προέρχεται από βλαστικά κύτταρα του ανθρώπινου οδοντικού πολφού (hDPSC). Τα κύτταρα αυτά προέρχονται από τον ιστό του οδοντικού πολφού, όπου υφίστανται ενζυματική πέψη για την απομόνωση του προσκολλημένου κλάσματος. Μόλις φθάσουν στο 70-80% της συρροής, τα κύτταρα υποκαλλιεργούνται και κρυοσυντηρούνται στο πέρασμα 1. Αυτό το θεμελιώδες βήμα είναι ζωτικής σημασίας για τη διατήρηση της κυτταρικής ακεραιότητας και τη διασφάλιση της βιωσιμότητας των βλαστικών κυττάρων για μελλοντικές εφαρμογές.

Ο επαναπρογραμματισμός των hDPSCs σε επαγόμενα πολυδύναμα βλαστικά κύτταρα (iPSCs) αποτελεί σημαντική πρόοδο, η οποία επιτυγχάνεται μέσω μιας τεχνικής επεισοδιακού επαναπρογραμματισμού. Η μέθοδος αυτή χρησιμοποιεί φορείς που ενσωματώνουν τους παράγοντες Yamanaka-Oct-4, Sox-2 και Klf-4-μαζί με p53 Anti-sense, EBNA-1 και έναν δείκτη κόκκινης φθορίζουσας πρωτεΐνης. Η επεισοδιακή προσέγγιση είναι ιδιαίτερα πλεονεκτική, καθώς αποφεύγεται η ενσωμάτωση των παραγόντων επαναπρογραμματισμού στο γονιδίωμα, διατηρώντας έτσι τη γενετική σταθερότητα των iPSC. Η προκύπτουσα γραμμή iPSC-hDPSC παρουσιάζει πολυδύναμα χαρακτηριστικά, καθιστώντας την πολύτιμο εργαλείο για την έρευνα στην αναγεννητική ιατρική, τη μοντελοποίηση ασθενειών και την ανακάλυψη φαρμάκων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Για να βελτιώσετε τη διαδικασία αποκόλλησης και επανασποράς των κυττάρων, ακολουθήστε τα παρακάτω βήματα:

1. Αφαιρέστε το χρησιμοποιημένο μέσο και ξεπλύνετε τα κύτταρα με PBS (χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο).
2. Προσθέστε το διάλυμα αποκόλλησης και αφήστε το να δράσει σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.
3. Προσθέστε προσεκτικά φρέσκο μέσο στα κύτταρα.
4. Διαχωρίστε απαλά τα κύτταρα για να εξασφαλίσετε την ελάχιστη δυνατή βλάβη.
5. Επικαλύψτε μια νέα πλάκα καλλιέργειας 6 πηγαδιών με βιτρονεκτίνη και σπείρετε τα διαχωρισμένα κύτταρα σε δύο πηγαδάκια για περαιτέρω καλλιέργεια.

Για να εξασφαλιστεί η βέλτιστη ανάπτυξη των κυττάρων και η πειραματική συνέπεια, συνιστάται η χρήση πυκνότητας σποράς 5.000 έως 10.000 κυττάρων/cm² μόλις τα κύτταρα προσαρμοστούν στις συνθήκες καλλιέργειας.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης