iPSC-hDPSC

A linha de células iPSC-hDPSC representa um modelo de ponta derivado de células estaminais da polpa dentária humana (hDPSCs). Estas células são originárias do tecido da polpa dentária, onde são submetidas a uma digestão enzimática para isolar a fração aderente. Quando atingem 70-80% de confluência, as células são subcultivadas e criopreservadas na Passagem 1. Este passo fundamental é crucial para manter a integridade celular e garantir a viabilidade das células estaminais para futuras aplicações.

A reprogramação de hDPSCs em células estaminais pluripotentes induzidas (iPSCs) é um avanço significativo, conseguido através de uma técnica de reprogramação epissomal. Este método utiliza vectores que incorporam os factores Yamanaka - Oct-4, Sox-2 e Klf-4 - juntamente com p53 Anti-sense, EBNA-1 e um marcador de proteína fluorescente vermelha. A abordagem epissomal é particularmente vantajosa, uma vez que evita a integração de factores de reprogramação no genoma, preservando assim a estabilidade genética das iPSCs. A linha de iPSC-hDPSC resultante apresenta caraterísticas pluripotentes, o que a torna uma ferramenta valiosa para a investigação em medicina regenerativa, modelação de doenças e descoberta de medicamentos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

Para melhorar o processo de descolamento e ressemeadura de células, siga estes passos:

1. Remover o meio gasto e enxaguar as células com PBS (sem cálcio e magnésio).
2. Adicionar a solução de descolamento e deixar atuar de acordo com as instruções do fabricante.
3. Adicionar cuidadosamente meio novo às células.
4. Dissociar suavemente as células para garantir o mínimo de danos.
5. Revestir uma nova placa de cultura de 6 poços com vitronectina e semear as células dissociadas em dois poços para posterior cultivo.

Para garantir um crescimento celular ótimo e uma consistência experimental, recomenda-se a utilização de uma densidade de sementeira de 5.000 a 10.000 células/cm² depois de as células se terem adaptado às condições de cultura.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia