iPSC-hDPSC

Az iPSC-hDPSC-sejtvonal a humán fogászati pulpa őssejtjeiből (hDPSC) származó élvonalbeli modell. Ezek a sejtek a fogászati pulpaszövetből származnak, ahol enzimatikus emésztésen mennek keresztül az adherens frakció izolálása érdekében. A 70-80%-os konfluencia elérése után a sejteket szubkultúrázzák és 1. passzázsban kriokonzerválják. Ez az alapozó lépés kulcsfontosságú a sejtek integritásának megőrzésében és az őssejtek életképességének biztosításában a későbbi alkalmazásokhoz.

A hDPSC-k indukált pluripotens őssejtekké (iPSC-k) történő átprogramozása jelentős előrelépés, amelyet egy epizomális átprogramozási technikával értünk el. Ez a módszer olyan vektorokat alkalmaz, amelyek a Yamanaka-faktorokat - Oct-4, Sox-2 és Klf-4 - tartalmazzák a p53 Anti-sense, EBNA-1 és egy vörös fluoreszcens fehérje marker mellett. Az epizomális megközelítés különösen előnyös, mivel elkerüli az átprogramozó faktorok beépülését a genomba, így megőrizve az iPSC-k genetikai stabilitását. Az így létrejött iPSC-hDPSC vonal pluripotens tulajdonságokkal rendelkezik, így értékes eszköz a regeneratív gyógyászat, a betegségmodellezés és a gyógyszerkutatás területén végzett kutatások számára.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

A sejtleválasztás és az újbóli beültetés folyamatának javítása érdekében kövesse az alábbi lépéseket:

1. Távolítsuk el az elhasznált tápfolyadékot, és öblítsük le a sejteket PBS-szel (kalcium és magnézium nélkül).
2. Adja hozzá a leválasztó oldatot, és hagyja hatni a gyártó utasításai szerint.
3. Óvatosan adjon friss tápfolyadékot a sejtekhez.
4. Óvatosan disszociáljuk a sejteket, hogy biztosítsuk a minimális károsodást.
5. Vond be egy friss 6 lyukú tenyésztőlemezt vitronektinnel, és a disszociált sejteket ültesd be két lyukba a további tenyésztéshez.

Az optimális sejtnövekedés és a kísérleti konzisztencia biztosítása érdekében ajánlott 5 000-10 000 sejt/cm² vetési sűrűséget alkalmazni, miután a sejtek alkalmazkodtak a tenyésztési körülményekhez.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban