iPSC-hDPSC

De iPSC-hDPSC-cellijn is een geavanceerd model dat is afgeleid van stamcellen uit de menselijke tandpulp (hDPSC's). Deze cellen zijn afkomstig uit tandpulpweefsel, waar ze een enzymatische digestie ondergaan om de adherente fractie te isoleren. Nadat de cellen 70-80% confluentie hebben bereikt, worden ze gesubcultiveerd en gecryopreserveerd op overgangsniveau 1. Deze fundamentele stap is cruciaal voor het behoud van deze stamcellen. Deze fundamentele stap is cruciaal om de cellulaire integriteit te behouden en de levensvatbaarheid van de stamcellen voor toekomstige toepassingen te garanderen.

De herprogrammering van hDPSC's tot geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSC's) is een belangrijke vooruitgang, die wordt bereikt met een episomale herprogrammeringstechniek. Deze methode maakt gebruik van vectoren die de Yamanaka-factoren-Oct-4, Sox-2 en Klf-4 bevatten, naast p53 anti-sense, EBNA-1 en een rood fluorescerend eiwitmarker. De episomale benadering is vooral voordelig omdat het de integratie van herprogrammeringsfactoren in het genoom vermijdt, waardoor de genetische stabiliteit van de iPSC's behouden blijft. De resulterende iPSC-hDPSC-lijn vertoont pluripotente kenmerken, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor onderzoek in de regeneratieve geneeskunde, modellering van ziekten en ontdekking van geneesmiddelen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

Volg deze stappen om het losmaken van de cellen en het opnieuw uitzaaien te verbeteren:

1. Verwijder het gebruikte medium en spoel de cellen met PBS (zonder calcium en magnesium).
2. Voeg de onthechtingsoplossing toe en laat deze inwerken volgens de instructies van de fabrikant.
3. Voeg voorzichtig vers medium toe aan de cellen.
4. Los de cellen voorzichtig om minimale schade te verzekeren.
5. Coat een verse 6-well kweekplaat met vitronectine en plaats de losgemaakte cellen in twee wells voor verdere kweek.

Voor een optimale celgroei en experimentele consistentie wordt aanbevolen om een zaaidichtheid van 5000 tot 10.000 cellen/cm² te gebruiken zodra de cellen zich aan de kweekomstandigheden hebben aangepast.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring