iPSC-hDPSC

IPSC-hDPSC hücre hattı, insan diş pulpası kök hücrelerinden (hDPSC'ler) türetilen son teknoloji bir modeli temsil etmektedir. Bu hücreler, yapışık fraksiyonu izole etmek için enzimatik sindirime tabi tutuldukları diş pulpası dokusundan kaynaklanır. 70-80 konfluansa ulaştıktan sonra, hücreler alt kültüre alınır ve Pasaj 1'de kriyoprezerve edilir. Bu temel adım, hücresel bütünlüğün korunması ve gelecekteki uygulamalar için kök hücrelerin canlılığının sağlanması açısından çok önemlidir.

HDPSC'lerin indüklenmiş pluripotent kök hücrelere (iPSC'ler) yeniden programlanması, epizomal yeniden programlama tekniğiyle elde edilen önemli bir ilerlemedir. Bu yöntemde p53 Anti-sense, EBNA-1 ve Kırmızı Floresan Protein işaretleyicisinin yanı sıra Yamanaka faktörleri-Oct-4, Sox-2 ve Klf-4'ü içeren vektörler kullanılmaktadır. Epizomal yaklaşım, yeniden programlama faktörlerinin genoma entegrasyonunu önlediği ve böylece iPSC'lerin genetik stabilitesini koruduğu için özellikle avantajlıdır. Ortaya çıkan iPSC-hDPSC hattı pluripotent özellikler sergileyerek rejeneratif tıp, hastalık modelleme ve ilaç keşfi araştırmaları için değerli bir araç haline gelmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Hücre ayırma ve yeniden ekme işlemini iyileştirmek için aşağıdaki adımları izleyin:

1. Kullanılmış ortamı çıkarın ve hücreleri PBS (kalsiyum ve magnezyum içermeyen) ile durulayın.
2. Ayırma solüsyonunu ekleyin ve üreticinin talimatlarına göre hareket etmesini bekleyin.
3. Hücrelere dikkatlice taze besiyeri ekleyin.
4. Minimum hasar sağlamak için hücreleri nazikçe ayırın.
5. Yeni bir 6 kuyulu kültür plakasını vitronektin ile kaplayın ve ayrıştırılmış hücreleri daha fazla ekim için iki kuyuya tohumlayın.

Optimum hücre büyümesini ve deneysel tutarlılığı sağlamak için, hücreler kültür koşullarına adapte olduktan sonra 5.000 ila 10.000 hücre/cm²'lik bir ekim yoğunluğu kullanılması önerilir.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın