Skip to content
KU812
Tissue
דם היקפי
Disease
לוקמיה מיאלואידית כרונית, BCR-ABL1 חיובי
Synonyms
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Documents

KU812

Cell line · Product number 305306

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים KU812 הוא קו תאים לוקמיים אנושיים שמקורו בחולה עם לוקמיה מיאלואידית כרונית (CML) בשלב משבר בלאסטי. הוא בולט ביכולתו להתמיין לשושלות בזופילית ואריתרואידית בתנאים ספציפיים, מה שהופך אותו לכלי חשוב לחקר התמיינות המטופויטית וממאירויות נלוות. קו התאים מציג מאפיינים של תאי אב בזופילים, כולל נוכחות של גרנולות מטכרומטיות החיוביות לצביעת טולואידין כחול ואסטרה כחול, והוא מסנתז היסטמין, המעיד על פעילות בזופילית.

תאי KU812 רלוונטיים במיוחד לחקר פסאודו-אלרגיה הקשורה להפעלת משלים (CARPA) ותגובות רגישות יתר המתווכות על ידי בזופילים. תועלת זו נובעת מתגובתם החזקה לחלבוני משלים כמו C3a ו-C5a, המפעילים שחרור של היסטמין ומתווכים דלקתיים אחרים, המדמים תגובות פסאודו-אלרגיות. תאי KU812 מבטאים סמנים על פני התא כגון CD63 ו-CD203c, הקשורים להפעלה ולדה-גרנולציה של בזופילים. סמנים אלה שימשו בפרוטוקולים מבוססי ציטומטריה זרימה להערכת התאימות האימונולוגית של תרופות ננו-רפואיות ותרופות ביולוגיות אחרות.

בנוסף, תאי KU812 מפגינים פוטנציאל התמיינות אריתרואידית כאשר הם מתורבתים בתנאים המכילים תוספת אריתרופואטין. זה כולל התבגרות ספונטנית לתאים אריתרואידיים המסוגלים לסנתז המוגלובין מסוגים שונים, כגון צורות בוגרות ועובריות. תכונות אלה מדגישות את השימושיות שלהם בחקר ייצור כדוריות דם אדומות לצד התמיינות בזופילית, מה שהופך את KU812 למודל רב-תכליתי למחקר המטולוגי.

Tissue
דם היקפי
Disease
לוקמיה מיאלואידית כרונית, BCR-ABL1 חיובי
Synonyms
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי לימפוציט
Cell type
תא אב של בזופילים
Karyotype
התאים מכילים לפחות כרומוזום Ph1 (פילדלפיה) אחד.

04Identifiers

Citation
KU812 (מספר קטלוגי Cytion 305306)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD3, ANPEP (CD13)
Mutational profile
מוטציה: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), הומוזיגוטי; מיזוג גנים: BCR-ABL, אקסון 14 של BCR התמזג עם אקסון 2 של ABL1 (תעתיק b3a2)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז ו-10 מ"מ HEPES
Subculturing
אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Seeding density
3 x 105 תאים/מ"ל
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
38 שנים
Ethnicity
יפנית

10Product details

Composition table