
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית כרונית, BCR-ABL1 חיובי
- Synonyms
- Ku812, KU-812, KU.812, KU 812
Documents
KU812
Cell line · Product number 305306
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים KU812 הוא קו תאים לוקמיים אנושיים שמקורו בחולה עם לוקמיה מיאלואידית כרונית (CML) בשלב משבר בלאסטי. הוא בולט ביכולתו להתמיין לשושלות בזופילית ואריתרואידית בתנאים ספציפיים, מה שהופך אותו לכלי חשוב לחקר התמיינות המטופויטית וממאירויות נלוות. קו התאים מציג מאפיינים של תאי אב בזופילים, כולל נוכחות של גרנולות מטכרומטיות החיוביות לצביעת טולואידין כחול ואסטרה כחול, והוא מסנתז היסטמין, המעיד על פעילות בזופילית.
תאי KU812 רלוונטיים במיוחד לחקר פסאודו-אלרגיה הקשורה להפעלת משלים (CARPA) ותגובות רגישות יתר המתווכות על ידי בזופילים. תועלת זו נובעת מתגובתם החזקה לחלבוני משלים כמו C3a ו-C5a, המפעילים שחרור של היסטמין ומתווכים דלקתיים אחרים, המדמים תגובות פסאודו-אלרגיות. תאי KU812 מבטאים סמנים על פני התא כגון CD63 ו-CD203c, הקשורים להפעלה ולדה-גרנולציה של בזופילים. סמנים אלה שימשו בפרוטוקולים מבוססי ציטומטריה זרימה להערכת התאימות האימונולוגית של תרופות ננו-רפואיות ותרופות ביולוגיות אחרות.
בנוסף, תאי KU812 מפגינים פוטנציאל התמיינות אריתרואידית כאשר הם מתורבתים בתנאים המכילים תוספת אריתרופואטין. זה כולל התבגרות ספונטנית לתאים אריתרואידיים המסוגלים לסנתז המוגלובין מסוגים שונים, כגון צורות בוגרות ועובריות. תכונות אלה מדגישות את השימושיות שלהם בחקר ייצור כדוריות דם אדומות לצד התמיינות בזופילית, מה שהופך את KU812 למודל רב-תכליתי למחקר המטולוגי.
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית כרונית, BCR-ABL1 חיובי
- Synonyms
- Ku812
- KU-812
- KU.812
- KU 812
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי לימפוציט
- Cell type
- תא אב של בזופילים
- Karyotype
- התאים מכילים לפחות כרומוזום Ph1 (פילדלפיה) אחד.
04Identifiers
- Citation
- KU812 (מספר קטלוגי Cytion 305306)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0379
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- CD3, ANPEP (CD13)
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), הומוזיגוטי; מיזוג גנים: BCR-ABL, אקסון 14 של BCR התמזג עם אקסון 2 של ABL1 (תעתיק b3a2)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז ו-10 מ"מ HEPES
- Subculturing
- אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
- Seeding density
- 3 x 105 תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 38 שנים
- Ethnicity
- יפנית
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table