KU812

A linhagem celular KU812 é uma linhagem de células leucêmicas humanas originalmente derivada de um paciente com leucemia mielóide crônica (LMC) na fase de crise blástica. Ela se destaca por sua capacidade de se diferenciar nas linhagens basofílica e eritróide sob condições específicas, tornando-a uma ferramenta valiosa para o estudo da diferenciação hematopoiética e de neoplasias relacionadas. A linha celular exibe características de precursores basofílicos, incluindo a presença de grânulos metacromáticos que apresentam reação positiva à coloração com azul de toluidina e azul de astra, além de sintetizar histamina, o que indica atividade basofílica.

As células KU812 são particularmente relevantes na investigação da pseudoalergia relacionada à ativação do complemento (CARPA) e de reações de hipersensibilidade mediadas por basófilos. Essa utilidade decorre de sua resposta robusta a proteínas do complemento, como C3a e C5a, que desencadeiam a liberação de histamina e outros mediadores inflamatórios, imitando reações pseudoalérgicas. As células KU812 expressam marcadores de superfície celular, como CD63 e CD203c, que estão associados à ativação e desgranulação basofílica. Esses marcadores têm sido empregados em protocolos baseados em citometria de fluxo para avaliar a compatibilidade imunológica de nanomedicamentos e outros produtos biológicos.

Além disso, as células KU812 demonstram potencial de diferenciação eritroide quando cultivadas em condições suplementadas com eritropoietina. Isso inclui a maturação espontânea em células eritroides capazes de sintetizar várias formas de hemoglobina, como as formas adultas e fetais. Essas características destacam sua utilidade no estudo da eritropoiese juntamente com a diferenciação basofílica, tornando as células KU812 um modelo versátil para pesquisas hematológicas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.