Mine otse sisu juurde
KU812
Kude
Perifeerne veri
Haigus
Krooniline müelogeenne leukeemia, BCR-ABL1-positiivne
Sünonüümid
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumendid

KU812

Cell line · Toote number 305306

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KU812 rakuliin on inimese leukeemiline rakuliin, mis on algselt saadud kroonilise müelogeense leukeemiaga (CML) patsiendilt blastilise kriisi faasis. See on märkimisväärne oma võime poolest diferentseeruda spetsiifilistes tingimustes basofiilseks ja erütroidseks liiniks, mis muudab selle väärtuslikuks vahendiks vereloome diferentseerumise ja sellega seotud pahaloomuliste haiguste uurimisel. Rakuliinil on basofiilsete eellaste tunnused, sealhulgas metakromaatilised graanulid, mis on positiivsed toluidiinsinise ja astrosinise värvimise suhtes, ning see sünteesib histamiini, mis viitab basofiilsele aktiivsusele.

KU812 rakud on eriti olulised komplemendi aktiveerimisega seotud pseudoallergia (CARPA) ja basofiilide poolt vahendatud ülitundlikkusreaktsioonide uurimisel. Selle kasulikkus tuleneb nende tugevast reaktsioonist komplemendi valkudele, nagu C3a ja C5a, mis vallandavad histamiini ja teisi põletikuvahendajaid, imiteerides pseudoallergilisi reaktsioone. KU812 rakud ekspresseerivad rakupinna markereid, nagu CD63 ja CD203c, mis on seotud basofiilide aktiveerimise ja degranulatsiooniga. Neid markereid on kasutatud voolutsütomeetriapõhistes protokollides nanomeditsiinide ja muude bioloogiliste ravimite immunoloogilise sobivuse hindamiseks.

Lisaks sellele näitavad KU812 rakud erütroidi diferentseerumise potentsiaali, kui neid kasvatatakse erütropoetiiniga täiendatud tingimustes. See hõlmab spontaanset küpsemist erütrooidseteks rakkudeks, mis on võimelised sünteesima erinevaid hemoglobiini, näiteks täiskasvanud ja loote vorme. Need omadused rõhutavad nende kasulikkust erütropoeesia uurimisel koos basofiilse diferentseerumisega, muutes KU812 mitmekülgseks mudeliks hematoloogilistes uuringutes.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
Krooniline müelogeenne leukeemia, BCR-ABL1-positiivne
Sünonüümid
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
Basofiilide progenitorrakud
Karyotüüp
Rakkudes on vähemalt üks Ph1 (Philadelphia) kromosoom.

04Tunnused

Viide
KU812 (Cytioni katalooginumber 305306)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CD3, ANPEP (CD13)
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homosügootne; geenifusion: BCR-ABL, BCR ekson 14 fusioon ABL1 ekson 2 (b3a2 transkriptsioon)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga, lisada 2,5 g/l glükoosi ja 10 mM HEPES
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
3 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
38 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani

10Toote üksikasjad

Koostis tabel