KU812

A linha de células KU812 é uma linha de células leucémicas humanas originalmente derivada de um doente com leucemia mieloide crónica (LMC) na fase de crise blástica. É notável pela sua capacidade de se diferenciar em linhagens basófilas e eritróides em condições específicas, o que a torna uma ferramenta valiosa para o estudo da diferenciação hematopoiética e de doenças malignas relacionadas. A linha celular apresenta caraterísticas de precursores basófilos, incluindo a presença de grânulos metacromáticos que são positivos para a coloração com azul de toluidina e azul de astra, e sintetiza histamina, indicativa de atividade basófila.

As células KU812 são particularmente relevantes na investigação da pseudoalergia relacionada com a ativação do complemento (CARPA) e das reacções de hipersensibilidade mediadas por basófilos. Esta utilidade decorre da sua resposta robusta a proteínas do complemento como C3a e C5a, que desencadeiam a libertação de histamina e outros mediadores inflamatórios, imitando reacções pseudoalérgicas. As células KU812 expressam marcadores de superfície celular como CD63 e CD203c, que estão associados à ativação e degranulação basofílicas. Estes marcadores têm sido utilizados em protocolos baseados na citometria de fluxo para avaliar a compatibilidade imunológica de nanomedicamentos e outros produtos biológicos.

Além disso, as células KU812 demonstram potencial de diferenciação eritroide quando cultivadas em condições de suplementação com eritropoietina. Isto inclui a maturação espontânea em células eritróides capazes de sintetizar várias hemoglobinas, tais como as formas adulta e fetal. Estas caraterísticas sublinham a sua utilidade no estudo da eritropoiese juntamente com a diferenciação basofílica, tornando a KU812 um modelo versátil para a investigação hematológica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia