Prejsť na obsah
KU812
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Chronická myelogénna leukémia, BCR-ABL1 pozitívna
Synonymá
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumenty

KU812

Cell line · Číslo výrobku 305306

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KU812 je ľudská leukemická bunková línia pôvodne odvodená od pacienta s chronickou myelogénnou leukémiou (CML) vo fáze blastickej krízy. Vyznačuje sa schopnosťou diferencovať sa za špecifických podmienok na bazofilnú a erytroidnú líniu, čo z nej robí cenný nástroj na štúdium diferenciácie krvotvorby a súvisiacich malignít. Bunková línia vykazuje vlastnosti bazofilných prekurzorov vrátane prítomnosti metachromatických granúl, ktoré sú pozitívne na farbenie toluidínovou modrou a astra modrou, a syntetizuje histamín, čo svedčí o bazofilnej aktivite.

Bunky KU812 sú obzvlášť dôležité pri skúmaní pseudoalergie súvisiacej s aktiváciou komplementu (CARPA) a reakcií precitlivenosti sprostredkovaných bazofilmi. Táto užitočnosť vyplýva z ich silnej reakcie na proteíny komplementu, ako sú C3a a C5a, ktoré spúšťajú uvoľňovanie histamínu a iných zápalových mediátorov, čím napodobňujú pseudoalergické reakcie. Bunky KU812 exprimujú povrchové bunkové markery, ako sú CD63 a CD203c, ktoré sú spojené s bazofilnou aktiváciou a degranuláciou. Tieto markery boli použité v protokoloch založených na prietokovej cytometrii na hodnotenie imunologickej kompatibility nanomedicín a iných biologických látok.

Okrem toho bunky KU812 vykazujú potenciál erytroidnej diferenciácie, keď sú kultivované v podmienkach s prídavkom erytropoetínu. To zahŕňa spontánne dozrievanie na erytroidné bunky schopné syntetizovať rôzne hemoglobíny, napríklad dospelé a fetálne formy. Tieto vlastnosti podčiarkujú ich užitočnosť pri štúdiu erytropoézy spolu s bazofilnou diferenciáciou, čo robí z KU812 univerzálny model pre hematologický výskum.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Chronická myelogénna leukémia, BCR-ABL1 pozitívna
Synonymá
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
Bazofilné progenitorové bunky
Karyotyp
Bunky obsahujú aspoň jeden Ph1 (filadelfský) chromozóm.

04Identifikátory

Citácia
KU812 (katalógové číslo Cytion 305306)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
CD3, ANPEP (CD13)
Mutčný profil
Mutácia: Lys132Arg (c.395A>G), homozygotná; Génová fúzia: BCR-ABL, exón 14 BCR fúzovaný s exónom 2 ABL1 (transkript b3a2)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, pridajte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
38 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský

10Podrobnosti o produkte

Tabuľka zloženia