Tartalomra ugrás
KU812
Szövet
Perifériás vér
Betegség
Krónikus myelogén leukémia, BCR-ABL1-pozitív
Szinonimák
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumentumok

KU812

Cell line · Termékszám 305306

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A KU812 sejtvonal egy humán leukémiás sejtvonal, amely eredetileg egy krónikus myelogén leukémiában (CML) szenvedő, a blasztikus krízis fázisában lévő betegből származik. Figyelemre méltó az a képessége, hogy meghatározott körülmények között képes bazofil és eritroid vonalba differenciálódni, ami értékes eszközzé teszi a vérképzőszervi differenciálódás és a kapcsolódó malignitások tanulmányozására. A sejtvonal a bazofil prekurzorok jellemzőit mutatja, beleértve a metakromatikus granulumok jelenlétét, amelyek pozitívak toluidinkék és asztrakék festésre, és hisztamint szintetizál, ami a bazofil aktivitásra utal.

A KU812 sejtek különösen fontosak a komplement aktivációval kapcsolatos pszeudoallergia (CARPA) és a bazofilok által közvetített túlérzékenységi reakciók vizsgálatában. Ez a hasznosság abból ered, hogy erőteljesen reagálnak az olyan komplementfehérjékre, mint a C3a és C5a, amelyek hisztamin és más gyulladásos mediátorok felszabadulását váltják ki, pszeudoallergiás reakciókat imitálva. A KU812 sejtek olyan sejtfelszíni markereket expresszálnak, mint a CD63 és a CD203c, amelyek a bazofil aktivációhoz és degranulációhoz kapcsolódnak. Ezeket a markereket áramlási citometrián alapuló protokollokban alkalmazták a nanomedicinák és más biológiai készítmények immunológiai kompatibilitásának értékelésére.

A KU812 sejtek emellett erythroid differenciálódási potenciált mutatnak, ha erythropoetin-kiegészítő körülmények között tenyésztik őket. Ez magában foglalja a spontán érést olyan eritroid sejtekké, amelyek képesek különböző hemoglobinok, például felnőtt és magzati formák szintézisére. Ezek a tulajdonságok kiemelik hasznosságukat az eritropoézis tanulmányozásában a bazofil differenciálódás mellett, ami a KU812-et a hematológiai kutatások sokoldalú modelljévé teszi.

Szövet
Perifériás vér
Betegség
Krónikus myelogén leukémia, BCR-ABL1-pozitív
Szinonimák
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblaszt-szerű
Sejttípus
Bazofil progenitor sejt
Kariotípus
A sejtek legalább egy Ph1 (Philadelphia) kromoszómát tartalmaznak.

04Azonosítók

Hivatkozás
KU812 (Cytion katalógusszám 305306)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
CD3, ANPEP (CD13)
Mutációs profil
Mutáció: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homozigóta; génfúzió: BCR-ABL, a BCR 14. exonja fuzionált az ABL1 2. exonjával (b3a2 transzkriptum)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Egészítsük ki a táptalajt 10% FBS-szel, adjunk hozzá 2,5 g/l glükózt és 10 mM HEPES-t
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Ültetési sűrűség
3 x 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
38 év
Etnikai hovatartozás
Japán

10Termékadatok

Összetételi táblázat