الانتقال إلى المحتوى
KU812
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
ابيضاض الدم النقوي المزمن، BCR-ABL1 إيجابي
المرادفات
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

المستندات

KU812

Cell line · رقم المنتج 305306

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا KU812 هو خط خلايا سرطان الدم البشري المشتق أصلاً من مريض مصاب بسرطان الدم النقوي المزمن (CU812) في مرحلة الأزمة البلاستيكية. ويتميز هذا الخط بقدرته على التمايز إلى سلالات الخلايا القاعدية والكريات الحمرية في ظل ظروف محددة، مما يجعله أداة قيّمة لدراسة التمايز المكونة للدم والأورام الخبيثة ذات الصلة. يُظهر هذا الخط الخلوي خصائص السلائف القاعدية، بما في ذلك وجود حبيبات متناهية الصبغة إيجابية للتولويدين الأزرق والأزرق أسترا الأزرق، كما أنه يُصنع الهيستامين، مما يدل على نشاط الخلايا القاعدية.

وتكتسب خلايا KU812 أهمية خاصة في دراسة الحساسية الزائفة المرتبطة بالتنشيط التكميلي (CARPA) وتفاعلات فرط الحساسية التي تتوسطها الخلايا القاعدية. تنبع هذه الفائدة من استجابتها القوية للبروتينات المكملة مثل C3a و C5a، والتي تؤدي إلى إطلاق الهيستامين وغيره من الوسطاء الالتهابيين، مما يحاكي تفاعلات الحساسية الزائفة. تعبّر خلايا KU812 عن علامات سطح الخلية مثل CD63 وCD203c، والتي ترتبط بالتنشيط القاعدي والتحلل. وقد تم استخدام هذه العلامات في البروتوكولات القائمة على قياس التدفق الخلوي لتقييم التوافق المناعي للأدوية النانوية وغيرها من الأدوية البيولوجية.

وبالإضافة إلى ذلك، تُظهر خلايا KU812 إمكانية التمايز بين الغدة الحمرية عند زراعتها في ظروف مدعمة بالإريثروبويتين. ويشمل ذلك النضج التلقائي إلى خلايا الغدة الدرقية الحمراء القادرة على تخليق أشكال مختلفة من الهيموغلوبينات، مثل الأشكال البالغة والجنينية. تؤكد هذه الميزات على فائدتها في دراسة الكريات الحمر إلى جانب التمايز القاعدي، مما يجعل KU812 نموذجاً متعدد الاستخدامات لأبحاث أمراض الدم.

الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
ابيضاض الدم النقوي المزمن، BCR-ABL1 إيجابي
المرادفات
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا اللمفاوية الشبيهة بالأرومة اللمفاوية
نوع الخلية
الخلية السلفية القاعدية
النمط الكروموسومي
تحتوي الخلايا على كروموسوم واحد على الأقل من كروموسوم Ph1 (فيلادلفيا).

04المعرّفات

المرجع
KU812 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305306)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0379

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
CD3، أنبيب (CD13)
الأنماط الطفريّة
الطفرة: TP53، p.Lys132Arg (c.395A>G)، متماثل الزيجوت؛ اندماج جيني: BCR-ABL، انصهار الإكزون 14 من BCR مع الإكزون 2 من ABL1 (نسخة b3a2)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ FBS، وأضف 2.5 جم/لتر جلوكوز و10 ملي مولار هيبيس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
3 × 105 خلية/مل
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
38 سنة
الأصل العرقي
ياباني

10تفاصيل المنتج

جدول التركيب