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KU812
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia mielógena crónica, BCR-ABL1 positivo
Sinónimos
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Documentos

KU812

Cell line · Número de producto 305306

€430.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

En stock
Lote
Recomendado (lote más fresco)
1

01Información general

Descripción

La línea celular KU812 es una línea celular leucémica humana derivada originalmente de un paciente con leucemia mielógena crónica (LMC) en fase de crisis blástica. Destaca por su capacidad para diferenciarse en linajes basófilos y eritroides en condiciones específicas, lo que la convierte en una valiosa herramienta para el estudio de la diferenciación hematopoyética y las neoplasias malignas relacionadas. La línea celular presenta características de precursores basófilos, como la presencia de gránulos metacromáticos positivos para la tinción con azul de toluidina y azul astra, y sintetiza histamina, lo que indica actividad basófila.

Las células KU812 son especialmente relevantes para investigar la pseudoalergia relacionada con la activación del complemento (CARPA) y las reacciones de hipersensibilidad mediadas por basófilos. Esta utilidad se deriva de su robusta respuesta a proteínas del complemento como C3a y C5a, que desencadenan la liberación de histamina y otros mediadores inflamatorios, imitando reacciones pseudoalérgicas. Las células KU812 expresan marcadores de superficie celular como CD63 y CD203c, asociados a la activación y degranulación basofílica. Estos marcadores se han empleado en protocolos basados en citometría de flujo para evaluar la compatibilidad inmunológica de nanomedicamentos y otros productos biológicos.

Además, las células KU812 demuestran potencial de diferenciación eritroide cuando se cultivan en condiciones suplementadas con eritropoyetina. Esto incluye la maduración espontánea en células eritroides capaces de sintetizar diversas hemoglobinas, como las formas adultas y fetales. Estas características subrayan su utilidad para estudiar la eritropoyesis junto con la diferenciación basófila, lo que convierte a KU812 en un modelo versátil para la investigación hematológica.

Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia mielógena crónica, BCR-ABL1 positivo
Sinónimos
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Linfoblasto
Tipo de célula
Célula progenitora de basófilos
Cariotipo
Las células contienen al menos un cromosoma Ph1 (Filadelfia).

04Identificadores

Referencia
KU812 (número de catálogo 305306 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
CD3, ANPEP (CD13)
Perfil mutacional
Mutación: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homocigoto; Fusión génica: BCR-ABL, exón 14 de BCR fusionado con el exón 2 de ABL1 (transcripción b3a2)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Completar el medio con un 10% de FBS, añadir 2,5 g/L de glucosa y 10 mM de HEPES
Subcultivo
Reunir las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lavar suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilizar 3-5 ml para matraces T25 y 5-10 ml para matraces T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para matraces T25, 2,5 ml para matraces T75) asegurando la cobertura completa de la capa celular. Dejar incubar las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combinar y centrifugar tanto la suspensión como las células adherentes. Tras la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos matraces que contengan medio fresco.
Densidad de siembra
3 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
38 años
Origen étnico
Japonés

10Detalles del producto

Tabla de composición