KU812

La línea celular KU812 es una línea celular leucémica humana derivada originalmente de un paciente con leucemia mielógena crónica (LMC) en fase de crisis blástica. Se destaca por su capacidad de diferenciarse en linajes basófilos y eritroides bajo condiciones específicas, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudiar la diferenciación hematopoyética y las neoplasias relacionadas. La línea celular presenta características de precursores basófilos, incluida la presencia de gránulos metacromáticos que dan positivo en la tinción con azul de toluidina y azul de Astra, y sintetiza histamina, lo cual es indicativo de actividad basófila.

Las células KU812 son particularmente relevantes en la investigación de la pseudoalergia relacionada con la activación del complemento (CARPA) y las reacciones de hipersensibilidad mediadas por basófilos. Esta utilidad se deriva de su respuesta robusta a proteínas del complemento como C3a y C5a, las cuales desencadenan la liberación de histamina y otros mediadores inflamatorios, imitando reacciones pseudoalérgicas. Las células KU812 expresan marcadores de superficie celular como CD63 y CD203c, que están asociados con la activación y la desgranulación basófila. Estos marcadores se han empleado en protocolos basados en citometría de flujo para evaluar la compatibilidad inmunológica de nanomedicamentos y otros productos biológicos.

Además, las células KU812 muestran potencial de diferenciación eritroide cuando se cultivan en condiciones suplementadas con eritropoyetina. Esto incluye la maduración espontánea en células eritroides capaces de sintetizar diversas hemoglobinas, como las formas adultas y fetales. Estas características resaltan su utilidad en el estudio de la eritropoyesis junto con la diferenciación basófila, lo que convierte a las células KU812 en un modelo versátil para la investigación hematológica.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.