Skip to content
KU812
Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวเรื้อรังชนิดไมอีลอยด์, BCR-ABL1 เป็นบวก
Synonyms
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Documents

KU812

Cell line · Product number 305306

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายเซลล์ KU812 เป็นสายเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวของมนุษย์ที่ได้มาจากผู้ป่วยโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเรื้อรังชนิดไมอีลอยด์ (CML) ในระยะวิกฤตแบบบลาสติก มีลักษณะเด่นคือสามารถเปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดเบโซฟิลและเซลล์เม็ดเลือดแดงภายใต้สภาวะเฉพาะ ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาการเปลี่ยนสภาพของเซลล์เม็ดเลือดและการเกิดมะเร็งที่เกี่ยวข้องเซลล์ไลน์แสดงลักษณะของเซลล์ต้นกำเนิดของเบโซฟิล รวมถึงการมีเม็ดสีเมตาโครมาติกที่แสดงผลบวกต่อการย้อมสีโทลูอิดีนบลูและแอสตราบลู และสังเคราะห์ฮีสตามีน ซึ่งบ่งชี้ถึงกิจกรรมของเบโซฟิล

เซลล์ KU812 มีความเกี่ยวข้องเป็นพิเศษในการศึกษาปฏิกิริยาแพ้เทียมที่เกี่ยวข้องกับการกระตุ้นคอมพลีเมนต์ (CARPA) และปฏิกิริยาภูมิไวเกินที่เกิดจากเบโซฟิล ความสามารถนี้เกิดจากปฏิกิริยาตอบสนองที่แข็งแกร่งต่อโปรตีนคอมพลีเมนต์ เช่น C3a และ C5a ซึ่งกระตุ้นการปล่อยฮีสตามีนและสารสื่อกลางการอักเสบอื่นๆ ทำให้เกิดปฏิกิริยาแพ้เทียมเซลล์ KU812 แสดงตัวบ่งชี้บนผิวเซลล์ เช่น CD63 และ CD203c ซึ่งเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นและการปลดปล่อยสารจากเบโซฟิล ตัวบ่งชี้เหล่านี้ถูกนำมาใช้ในโปรโตคอลที่ใช้โฟลไซโตเมทรีเพื่อประเมินความเข้ากันทางภูมิคุ้มกันของนาโนยาและชีววัตถุอื่น ๆ

นอกจากนี้ เซลล์ KU812 ยังแสดงศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์เม็ดเลือดแดงเมื่อเพาะเลี้ยงในสภาวะที่มีสารเสริมอีริโทรโพเอติน ซึ่งรวมถึงการเจริญเติบโตโดยธรรมชาติเป็นเซลล์เม็ดเลือดแดงที่สามารถสังเคราะห์ฮีโมโกลบินได้หลากหลายรูปแบบ เช่น รูปแบบของผู้ใหญ่และทารกในครรภ์ คุณสมบัติเหล่านี้เน้นย้ำถึงประโยชน์ในการศึกษาการสร้างเม็ดเลือดแดงควบคู่ไปกับการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์เบโซฟิลิก ทำให้ KU812 เป็นแบบจำลองที่หลากหลายสำหรับการวิจัยด้านโลหิตวิทยา

Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวเรื้อรังชนิดไมอีลอยด์, BCR-ABL1 เป็นบวก
Synonyms
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายลิมโฟบลาสต์
Cell type
เซลล์ต้นกำเนิดบาโซฟิล
Karyotype
เซลล์มีโครโมโซม Ph1 (ฟิลาเดลเฟีย) อย่างน้อยหนึ่งตัว

04Identifiers

Citation
KU812 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305306)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ซีดี3, แอนพีอีพี (ซีดี13)
Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), ชนิดโฮโมไซโกต; การรวมยีน: BCR-ABL, BCR exon 14 รวมกับ ABL1 exon 2 (b3a2 transcript)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% ใส่กลูโคส 2.5 กรัม/ลิตร และ HEPES 10 มิลลิโมลาร์
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
3 x 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
38 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น

10Product details

Composition table