Gå direkte til indholdet
KU812
Væv
Perifert blod
Sygdom
Kronisk myelogen leukæmi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumenter

KU812

Cell line · Varenummer 305306

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KU812-cellelinjen er en human leukæmisk cellelinje, der oprindeligt stammer fra en patient med kronisk myelogen leukæmi (CML) i den blastiske krisefase. Den er kendt for sin evne til at differentiere sig til basofile og erythroide linjer under specifikke forhold, hvilket gør den til et værdifuldt værktøj til at studere hæmatopoietisk differentiering og relaterede maligniteter. Cellelinjen udviser karakteristika for basofile forstadier, herunder tilstedeværelsen af metakromatiske granula, der er positive for toluidinblå og astrablå farvning, og den syntetiserer histamin, hvilket indikerer basofil aktivitet.

KU812-celler er særligt relevante til undersøgelse af komplementaktiveringsrelateret pseudoallergi (CARPA) og overfølsomhedsreaktioner medieret af basofiler. Denne anvendelighed skyldes deres robuste reaktion på komplementproteiner som C3a og C5a, som udløser frigivelse af histamin og andre inflammatoriske mediatorer, der efterligner pseudoallergiske reaktioner. KU812-celler udtrykker celleoverflademarkører som CD63 og CD203c, som er forbundet med basofil aktivering og degranulering. Disse markører er blevet anvendt i flowcytometri-baserede protokoller til at evaluere den immunologiske kompatibilitet af nanomedicin og andre biologiske lægemidler.

Derudover viser KU812-celler erythroid differentieringspotentiale, når de dyrkes under erythropoietin-supplerede forhold. Dette omfatter spontan modning til erythroide celler, der er i stand til at syntetisere forskellige hæmoglobiner, såsom voksne og føtale former. Disse egenskaber understreger deres anvendelighed til at studere erythropoiesis sammen med basofil differentiering, hvilket gør KU812 til en alsidig model for hæmatologisk forskning.

Væv
Perifert blod
Sygdom
Kronisk myelogen leukæmi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
Basofil progenitorcelle
Karyotype
Cellerne indeholder mindst ét Ph1 (Philadelphia)-kromosom.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KU812 (Cytion katalognummer 305306)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
CD3, ANPEP (CD13)
Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homozygot; Genfusion: BCR-ABL, BCR exon 14 fusioneret til ABL1 exon 2 (b3a2 transkript)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Supplér mediet med 10 % FBS, tilsæt 2,5 g/L glukose og 10 mM HEPES
Oddyrkning
Saml de suspenderede celler i et 15 ml rør, og vask forsigtigt de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (brug 3-5 ml til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml til T25-kolber, 2,5 ml til T75-kolber) for at sikre fuld dækning af cellelaget. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter inkubationen kombineres og centrifugeres både suspensionen og de vedhæftede celler. Efter centrifugering resuspenderes cellepelleten forsigtigt, og cellesuspensionen overføres til nye kolber, der indeholder frisk medium.
Såtæthed
3 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
38 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk

10Produktoplysninger

Sammensætningstabel