Pāriet uz saturu
KU812
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Hroniska mielogēna leikēmija, BCR-ABL1 pozitīva
Sinonīmi
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumenti

KU812

Cell line · Preces numurs 305306

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KU812 šūnu līnija ir cilvēka leikēmisko šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no pacienta ar hronisku mielogēnu leikēmiju (HML) blastiskās krīzes fāzē. Tā izceļas ar spēju noteiktos apstākļos diferencēties bazofīlā un eritroīdā līnijā, padarot to par vērtīgu instrumentu asinsrades diferenciācijas un ar to saistīto ļaundabīgo audzēju izpētei. Šai šūnu līnijai piemīt bazofīlo prekursoru pazīmes, tostarp metahromatisku granulu klātbūtne, kas ir pozitīvas toluidīna zilajam un astra zilajam krāsojumam, un tā sintezē histamīnu, kas norāda uz bazofīlu aktivitāti.

KU812 šūnas ir īpaši nozīmīgas, pētot ar komplementa aktivāciju saistītu pseidoalerģiju (CARPA) un paaugstinātas jutības reakcijas, ko mediē bazofili. Šo lietderību nosaka to spēcīgā reakcija uz komplementa proteīniem, piemēram, C3a un C5a, kas izraisa histamīna un citu iekaisuma mediatoru izdalīšanos, imitējot pseidoalerģiskas reakcijas. KU812 šūnas ekspresē tādus šūnu virsmas marķierus kā CD63 un CD203c, kas ir saistīti ar bazofīlu aktivāciju un degranulāciju. Šie marķieri ir izmantoti uz plūsmas citometriju balstītos protokolos, lai novērtētu nanomedicīnu un citu bioloģisko zāļu imunoloģisko saderību.

Turklāt KU812 šūnas uzrāda eritroīdu diferenciācijas potenciālu, ja tās kultivē ar eritropoetīnu papildinātos apstākļos. Tas ietver spontānu nobriešanu par eritroīdām šūnām, kas spēj sintezēt dažādus hemoglobīnus, piemēram, pieaugušo un augļa formas. Šīs īpašības uzsver to lietderību eritropoēzes un bazofīlu diferenciācijas izpētē, padarot KU812 par daudzpusīgu modeli hematoloģiskiem pētījumiem.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Hroniska mielogēna leikēmija, BCR-ABL1 pozitīva
Sinonīmi
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Bazofilu progenitoru šūnas
Kariotips
Šūnās ir vismaz viena Ph1 (Filadelfijas) hromosoma.

04Identifikatori

Atsauce
KU812 (Cytion kataloga numurs 305306)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CD3, ANPEP (CD13)
Mutāciju profils
Mutācija: Lys132Arg (c.395A>G), homozigotiska; gēnu saplūšana: BCR-ABL, BCR eksons 14 saplūdis ar ABL1 eksonu 2 (b3a2 transkripts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, pievienojiet 2,5 g/l glikozes un 10 mM HEPES
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
3 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
38 gadi
Etniskā piederība
Japāņu

10Informācija par produktu

Sastāva tabula