Pereiti prie turinio
KU812
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Lėtinė mielogeninė leukemija, BCR-ABL1 teigiama
Sinonimai
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumentai

KU812

Cell line · Prekės numeris 305306

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KU812 ląstelių linija yra žmogaus leukeminių ląstelių linija, iš pradžių gauta iš paciento, sergančio lėtine mielogenine leukemija (LML) blastinės krizės fazėje. Ji išsiskiria gebėjimu specifinėmis sąlygomis diferencijuotis į bazofilinę ir eritroidinę linijas, todėl yra vertingas įrankis kraujodaros diferenciacijai ir su ja susijusiems piktybiniams navikams tirti. Šiai ląstelių linijai būdingi bazofilinių pirmtakų požymiai, įskaitant metachromatines granules, kurios teigiamai dažomos toluidino mėlynuoju ir astros mėlynuoju dažais, ir ji sintetina histaminą, o tai rodo bazofilinį aktyvumą.

KU812 ląstelės ypač svarbios tiriant su komplemento aktyvacija susijusią pseudoalergiją (CARPA) ir padidėjusio jautrumo reakcijas, kurioms tarpininkauja bazofilai. Šį naudingumą lemia jų stipri reakcija į komplemento baltymus, tokius kaip C3a ir C5a, kurie sukelia histamino ir kitų uždegimo mediatorių išsiskyrimą, imituojantį pseudoalergines reakcijas. KU812 ląstelės išreiškia ląstelių paviršiaus žymenis, tokius kaip CD63 ir CD203c, kurie yra susiję su bazofilų aktyvacija ir degranuliacija. Šie žymenys buvo naudojami srauto citometrija pagrįstuose protokoluose, skirtuose nanomedikamentų ir kitų biologinių vaistų imunologiniam suderinamumui įvertinti.

Be to, KU812 ląstelės pasižymi eritroidų diferenciacijos potencialu, kai yra auginamos eritropoetinu papildytomis sąlygomis. Tai apima spontanišką brendimą į eritroidines ląsteles, galinčias sintetinti įvairius hemoglobinus, pavyzdžiui, suaugusiųjų ir vaisiaus formas. Šios savybės pabrėžia jų naudingumą tiriant eritropoezę kartu su bazofiline diferenciacija, todėl KU812 yra universalus hematologinių tyrimų modelis.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Lėtinė mielogeninė leukemija, BCR-ABL1 teigiama
Sinonimai
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
Bazofilų progenitorinės ląstelės
Kariotipas
Ląstelėse yra bent viena Ph1 (Filadelfijos) chromosoma.

04Identifikatoriai

Nuoroda
KU812 (Cytion katalogo numeris 305306)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
CD3, ANPEP (CD13)
Mutacijų profilis
Mutacija: Lys132Arg (c.395A>G), homozigotinė; genų sintezė: BCR-ABL, BCR 14 egzonas susijungęs su ABL1 2 egzonu (b3a2 transkriptas)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, pridėkite 2,5 g/l gliukozės ir 10 mM HEPES
Subkultūrinis auginimas
Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
Sėjos tankis
3 x 105 ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
38 metai
Etninė priklausomybė
Japonų

10Produkto aprašymas

Sudėties lentelė