Gå til innholdet
KU812
Vev
Perifert blod
Sykdom
Kronisk myelogen leukemi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumenter

KU812

Cell line · Produktnummer 305306

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KU812-cellelinjen er en human leukemisk cellelinje som opprinnelig stammer fra en pasient med kronisk myelogen leukemi (KML) i den blastiske krisefasen. Den er kjent for sin evne til å differensiere til basofile og erytroide linjer under spesifikke forhold, noe som gjør den til et verdifullt verktøy for studier av hematopoietisk differensiering og relaterte maligniteter. Cellelinjen har egenskaper som kjennetegner basofile forløpere, blant annet tilstedeværelsen av metakromatiske granula som er positive for toluidinblått og astrablått, og den syntetiserer histamin, noe som indikerer basofil aktivitet.

KU812-celler er spesielt relevante for å undersøke komplementaktiveringsrelatert pseudoallergi (CARPA) og hypersensitivitetsreaksjoner som medieres av basofile celler. Dette skyldes deres robuste respons på komplementproteiner som C3a og C5a, som utløser frigjøring av histamin og andre inflammatoriske mediatorer, noe som etterligner pseudoallergiske reaksjoner. KU812-celler uttrykker celleoverflatemarkører som CD63 og CD203c, som er forbundet med basofil aktivering og degranulering. Disse markørene har blitt brukt i flowcytometri-baserte protokoller for å evaluere den immunologiske kompatibiliteten til nanomedisiner og andre biologiske legemidler.

I tillegg viser KU812-celler potensial for erytroid differensiering når de dyrkes under erytropoietin-supplerte forhold. Dette inkluderer spontan modning til erytroide celler som er i stand til å syntetisere ulike hemoglobiner, for eksempel voksne og føtale former. Disse egenskapene understreker nytten av KU812 i studier av erytropoiese ved siden av basofil differensiering, noe som gjør dem til en allsidig modell for hematologisk forskning.

Vev
Perifert blod
Sykdom
Kronisk myelogen leukemi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
Basofil progenitorcelle
Karyotype
Cellene inneholder minst ett Ph1-kromosom (Philadelphia).

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KU812 (Cytion-katalognummer 305306)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
CD3, ANPEP (CD13)
Mutasjonsprofil
Mutasjon: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homozygot; Genfusjon: BCR-ABL, BCR-ekson 14 fusjonert med ABL1-ekson 2 (b3a2-transkript)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler med 10 % FBS, tilsett 2,5 g/L glukose og 10 mM HEPES
Subkultivering
Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
Såtetthet
3 x 105 celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
38 år
Etnisitet
Japansk

10Produktdetaljer

Sammensetningstabell